EV71人源化特异性单克隆抗体分泌细胞筛选方法的建立及优化的开题报告题目：EV71人源化特异性单克隆抗体分泌细胞筛选方法的建立及优化一、研究背景与意义肠道病毒71型（EV71）是一种致病性较强的RNA病毒，主要引起手足口病和脑炎等疾病，并在亚洲地区引发了较多的疫情。目前尚无特效的治疗手段和预防疫苗，因此开发特异性、高效的EV71抗体对于疫情的应对和预防具有重要的意义。单克隆抗体（mAb）是一种广泛应用于生物医学领域的分子工具，具有高特异性、高亲和力和高稳定性等优点，在免疫治疗、诊断、药物研发等方面有广泛应用。目前，通过抗原免疫小鼠或兔子，然后通过细胞融合技术筛选出具有特异性的单克隆抗体是一种主要的制备方法。但是，由于小鼠抗体在人体中会产生免疫原性反应，因此相对较为安全和经济的制备途径是通过人源化技术制备出特异性的单克隆抗体，这种制备方法成为了研究重点。二、研究内容本项目旨在建立EV71人源化特异性单克隆抗体分泌细胞筛选方法的优化，主要包括以下研究内容：1.筛选克隆细胞株在进行制备EV71特异性单克隆抗体的过程中，首先要从单克隆细胞株中筛选出具有较好的分泌效率和稳定性的细胞。本项目将通过筛选、鉴定和优化不同细胞系，最终确定一种适合生产特异性EV71单克隆抗体的细胞系。2.优化培养条件在细胞培养的过程中，培养条件的优化对细胞的生长、分泌情况和抗体产量等有很大的影响，本研究将通过优化培养条件，达到提高细胞生长速度和细胞分泌抗体产量的目的。3.抗体筛选方法的建立与优化对于制备出的EV71特异性单克隆抗体，需要进行抗体筛选。本项目将利用细胞分泌抗体的特性，建立快速、可靠的EV71特异性单克隆抗体筛选方法，以提高抗体纯度和稳定性。三、研究方法1.筛选克隆细胞株：利用单克隆细胞技术建立EV71特异性单克隆抗体细胞株，对不同细胞系进行筛选、鉴定和优化，最终确定适合生产的细胞系。2.优化培养条件：通过对细胞培养基的配方、温度、CO2浓度、培养周期、通气等培养条件的优化，调节细胞生长和抗体产量。3.抗体筛选方法的建立与优化：采用ELISA、Westernblot和流式细胞术等方法，建立EV71特异性单克隆抗体快速、可靠的筛选方法，并优化其抗体纯度和稳定性。四、研究意义本研究旨在建立EV71人源化特异性单克隆抗体分泌细胞筛选方法的优化，可以通过这项研究制备出具有优异的特异性和活性的单克隆抗体，可以在EV71感染治疗和预防等方面发挥重要作用。同时，该研究对于开发和优化其他疾病相关单克隆抗体的制备方法也具有参考意义。