药敏试验方法介绍耐药菌问题日益严重抗微生物治疗面临困境药敏试验方法简介一、抗菌药品敏感试验（AST）（1）抗菌药品选择在我国主要遵照临床试验室标准化委员会（ClinicalandLaboratoryStandardsInstitute,CLSI）制订抗菌药品选择标准A组：对特定菌群常规测试并汇报药品B组：可常规测试、选择性汇报药品C组：替换性或补充性药品U组：仅用于泌尿道感染抗菌药品葡萄球菌属抗菌药品药敏试验推荐分组肠杆菌科抗菌药品敏感试验推荐分组假单胞菌属抗菌药品药品敏感推荐分组不动杆菌属抗菌药品药敏试验推荐分组肠球菌属抗菌药品药敏试验推荐分组肺炎链球菌抗菌药品药敏试验推荐分组药敏试验折点亦遵照每年最新公布CLSI标准进行，分为敏感（S）、耐药（R）和中介（I）。敏感：分离菌株能被测试药品使用推荐剂量时在感染部位通常可到达抗菌药品浓度所抑制耐药：分离菌株不能被测试药品常规剂量可到达药品浓度所抑制；分离菌株可能存在一些特定耐药机制；治疗研究显示药品对分离菌株临床疗效不可靠二、抗菌药品种类及作用机制三、药敏试验方法学2.自动仪器药敏系统纸片扩散法（K-B法）原理：抑菌圈大小反应受试菌对测定药品敏感程度，并与该药对测试菌MIC呈负相关。准备抗菌药品纸片和水解酪蛋白（M-H）培养基；挑取孵育16～24小时已分纯菌落，置于生理盐水管中，振荡混匀后校正浓度至0.5麦氏标准；用无菌棉拭子蘸取菌液，在试管内壁旋转挤去多出菌液，然后在MH琼脂表面均匀涂布接种3次，每次旋转平板60度，最终沿平板内缘涂抹1周；平板在室温下干燥3～5min，用无菌镊子或商品化纸片分配器将含药纸片紧贴于琼脂表面；35℃孵育16～24小时，量取抑菌圈直径；依据抑菌环直径，按照CLSI标准判读，汇报敏感、中介、耐药。2024/9/12扩散法药敏影响原因稀释法以一定浓度抗菌药品与含有受试菌培养基进行一系列不一样倍数稀释（通常为双倍稀释），培养16～24h后，经过观察细菌生长现象来测得药品对受试菌最低抑菌浓度（MIC）。稀释法（MIC法）肉汤稀释法常量稀释法微量肉汤稀释法药敏试验方法简介药敏试验方法简介接种后应充分混匀，但不能有气泡产生静置培养培养温度；35℃气体环境：全部细菌（包含苛养菌）均置大气环境；厌氧菌置厌氧环境；微需氧菌置微需氧环境；淋菌琼脂稀释法置CO2培养时间：18小时药敏结果汇报可用MIC（μg/ml）或对照CLSI标准用S、R和I汇报。对于稀释法批量试验，有时需要汇报MIC50、MIC90。稀释法药敏影响原因E-test法将稀释法和扩散法原理结合起来，直接测定药品对受试菌MIC。MIC值标注于试条光面Etest操作程序药敏试验方法简介药敏试验方法简介药敏试验方法简介PhoenixTM100判定板革兰氏阳性板、革兰氏阴性板生化反应组合药敏试验方法简介药敏试验方法简介加一滴AST指示剂到AST肉汤中从ID肉汤管中准确吸收25L菌悬液，加入到AST肉汤中将肉汤倒入检测板，盖盖子。检测板已准备好，能够上机检测。扫描板条，输入资料将检测板放入仪器（随意位置）强大软件支持：BDXpert微生物教授系统帮助解释和监测检测结果检测结果分别可分别传入LIS系统或BDEpicenter数据管理系统或打印机，并能进行各种统计学分析检测反应孔内微生物生长情况浊度（传统方法）：微生物生长形成小颗粒和聚集成团块氧化还原作用（BD专利技术）：经过药敏试验指示剂颜色改变检测微生物新陈代谢浊度与氧化还原改变经过红、蓝、绿光每20分钟检测一次举例：SIR解释举例：天然耐药结果显示判定结果(用户可修改)MIC值来自标准解释BDXpert教授系统SIR结果最终止果(用户可修改)TCP/IP以太网大家辛劳了！谢谢各位！