铽掺杂纳米羟基磷灰石标记人脂肪来源干细胞及其体内示踪研究的任务书任务书一、研究背景脂肪来源干细胞（adipose-derivedmesenchymalstemcells,ADSCs）具有分化成多种细胞类型的潜能和强大的免疫调节作用，因此临床应用前景广阔。然而，随着ADSCs应用的开展，其体内跟踪追踪以及安全性评价亟待解决的问题成为了研究的热点。为此，近年来学者们利用纳米材料标记ADSCs用于追踪研究。而羟基磷灰石（hydroxyapatite,HA）作为一种主要的骨、牙、骨缺失修复等领域中常用的材料，近来已被证明可以作为生物医用纳米材料，应用在干细胞追踪方面也成为了研究的焦点之一。而铽（terbium，Tb）元素则因其稳定的荧光性能与HA材料制备的纳米复合材料具有很高的信号强度和稳定性，已发展成为ADSCs体内追踪的理想探针。然而，目前对于铽掺杂纳米羟基磷灰石（Tb-dopedHA,Tb-HA）标记ADSCs体内示踪性能的研究还相对较少。因此，本次研究旨在制备纳米级别的Tb-HA，标记ADSCs，并对其进行体内示踪研究。二、研究目的1.制备纳米级别的Tb-HA，优化其制备条件；2.标记ADSCs，通过TEM、SEM、XRD等手段对其进行表征；3.通过小动物体内实验，观察Tb-HA标记的ADSCs在体内的分布情况和追踪效果；4.初步探讨Tb-HA标记的ADSCs在体内的生物安全性和免疫耐受性。三、研究内容与方案1.制备纳米级别的Tb-HA（1）实验材料：氯化铽（TbCl3∙6H2O）、三聚磷酸（Na3PO4）、β-磷酸二氢钙（beta-CaHPO4）、多聚体（PVP，分子量为1.3万）、乙二醇（EG）、去离子水等。（2）实验步骤：1)将TbCl3∙6H2O加入去离子水中，搅拌溶解，得到Tb离子水溶液；2)加入Na3PO4，得到Tb-PO4沉淀；3)将beta-CaHPO4加入Tb-PO4水溶液中与之反应，生成Tb-dopedHA（Tb-HA）纳米复合材料；4)加入PVP和EG混合溶解液，控制反应温度，调整制备条件，优化Tb-HA纳米复合材料的形貌、尺寸和性能。2.标记ADSCs并表征将Tb-HA与ADSCs共培养，通过TEM、SEM、XRD、EDX等手段对其进行表征。3.体内实验将标记的ADSCs注入小鼠身体内，通过活体荧光成像技术、生物荧光成像技术等手段观察其分布情况和追踪效果。4.生物安全性和免疫耐受性评价观察小鼠体内注射Tb-HA标记的ADSCs后其健康情况，收集血液样本进行检测，分析其免疫反应情况，以初步评价该纳米复合材料的生物安全性和免疫耐受性。四、研究意义本研究将有助于探讨Tb-HA标记ADSCs在体内的追踪效果和安全性评价，为该组合材料的生物医学应用提供实验依据，为干细胞追踪及探索干细胞在组织再生及修复中的作用机制等前沿医学问题提供理论和实验基础。