食管鳞癌抑癌基因启动子甲基化及微卫星不稳定的研究的开题报告【研究背景和意义】食管癌是全球范围内常见的恶性肿瘤之一，其中鳞癌是最常见的类型。虽然近年来通过手术和综合治疗等方法对食管癌的治疗取得了一定进展，但鳞癌依然具有高度侵袭性和转移性，且治愈率很低，其发病原因复杂，仍然需要深入研究。甲基化和微卫星不稳定（MSI）是恶性肿瘤发生和发展的重要遗传机制，多个研究表明在食管癌中甲基化和MSI现象普遍存在，而且直接或间接参与食管癌的发生和进程。因此，我们希望通过对食管鳞癌抑癌基因启动子甲基化和MSI的研究，能够为鳞癌的治疗和预防提供新的思路和方法。【研究内容和方案】1.研究对象和样本采集选取30例食管鳞癌患者，同时采集30例正常对照组的组织样本。病例组的组织样本需经病理学诊断比较明确的食管鳞癌患者，纳入标准为初次诊断、无放疗、化疗预处理以及其他恶性肿瘤合并。2.DNA甲基化分析采用DNAbisulfiteconversion技术将组织样本转化为可能发生甲基化的DNA。利用甲基化特异性PCR扩增抑癌基因启动子区域，通过测序进行分析。甲基化水平通过测序比对以及定量PCR分析进行判断。3.MSI分析采用PCR扩增MSI位点进行分析，并根据国际微卫星不稳定专家组的标准进行分类和评定。【研究预期结果】通过对食管鳞癌抑癌基因启动子甲基化和MSI的研究，期望获得以下结果：1.发现并鉴定一批与食管鳞癌发生和发展相关的抑癌基因。2.揭示食管鳞癌抑癌基因启动子甲基化和MSI与食管鳞癌发生和发展机制的密切相关性。3.为食管鳞癌的预防和治疗提供新的分子生物学基础。【研究所需条件和保障】1.实验室设备：PCR仪、电泳仪、DNA甲基化测序分析仪等。2.实验室试剂和材料：DNA提取试剂盒、PCR试剂盒、甲基化转换试剂盒等。3.人力资源：实验技术员、病理学专家、生物信息学分析技术人员等。4.财务保障：实验室实验费用、数据分析费用、发表论文费用等。