细胞增殖3PPT课件.pptx
上传人:王子****青蛙 上传时间:2024-09-13 格式:PPTX 页数:85 大小:7.1MB 金币:10 举报 版权申诉
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Addyourtitle第一节细胞周期细胞增殖通过细胞增殖周期(cellcycle)实现。细胞周期的有序运行则通过相关基因的严格监视与精密调控来保证。细胞无限制增长对动物或人类个体而言意味着癌症(áizhènɡ),而个体无限制的繁殖对地球来说意味着生态灾难。细胞(xìbāo)周期(Cellcycle):从一次细胞(xìbāo)分裂(celldivision)结束,经物质积累到下一次细胞(xìbāo)分裂结束为止,所经历的过程称为细胞(xìbāo)周期,也称细胞(xìbāo)增殖周期(cellreproductivecycle)。3HTdR脉冲标记放射自显影(xiǎnyǐng)实验发现细胞在间期复制DNA,由于脉冲标记后的某些时间段观察到的分裂细胞染色体没有放射性,表明只在间期的某个阶段DNA才发生复制。根据不同的核素标记实验结果,将细胞周期间期中,DNA复制的这段时间称为DNA合成期(S期),在此之前有丝分裂之后的一段时间称DNA合成前期(qiánqī)(Gap1phase,G1期);DNA复制结束后到有丝分裂之前的一段时间称DNA合成后期(Gap2phase,G2期)。至此,根据周期中分裂细胞的形态与生化特征,细胞周期被分为G1、S、G2、M期四个时相。/(1)周期中细胞(cyclingcell,或连续(liánxù)分裂细胞):细胞周期连续(liánxù)运转,细胞持续分裂分化。如表皮生发层细胞、部分骨髓细胞;(2)静止期细胞(quiescentcell,或G0期细胞/休眠细胞):休眠的暂不分裂的细胞。在适当的刺激下可重新进入细胞周期。如淋巴细胞、肝细胞、肾细胞等。(3)终末分化细胞(terminaldifferentiationcell):不可逆地脱离(tuōlí)细胞周期,不再分裂的细胞/特化细胞,也称终端细胞。如神经、肌肉、多形核中性粒细胞等。主要的生化事件有:合成rRNA、蛋白质、脂类和糖类等,为DNA合成作准备。检验点(checkpoint):在细胞周期中可使细胞周期运转暂停的位点,在这一点上细胞内各条件(tiáojiàn)适宜才允许细胞进入周期的下一阶段。G1期检验点(G1checkpoint)也称限制点(restriction/R点):此处需要调查的事件有:DNA是否损伤?细胞外环境是否适宜?细胞体积是否足够(zúgòu)大?(芽殖酵母中此点称起始点Start)。/主要的生化事件:DNA和组蛋白(histone)的合成。S期检验(jiǎnyàn)点:监察DNA复制是否完全?主要的生化事件:大量合成ATP、RNA以及(yǐjí)与细胞分裂相关的蛋白质。为细胞分裂作准备。G2/M期检验点:DNA损伤是否已被修复?细胞体积是否够大?主要的生化(shēnɡhuà)事件:细胞染色质凝集,分离并平均分配到两个子代细胞,细胞一分为二。细胞增殖的直接实施阶段。M期的中-后期检验点:纺锤体组装检验点。细胞分裂的方式有三种:真核细胞分裂主要包括(bāokuò)两种方式:有丝分裂Mitosis,体细胞分裂方式;减数分裂Meiosis,性细胞分裂方式。原核细胞以无丝分裂Amitosis的方式完成细胞分裂。第三节特殊(tèshū)细胞周期酵母细胞的细胞周期与标准的细胞周期在时相和调控方面相似。酵母细胞周期明显特点:酵母细胞周期持续时间较短;封闭式细胞分裂,即细胞分裂时核膜(hémó)不解体;纺锤体位于细胞核内;在一定环境下,也进行有性繁殖。3.植物(zhíwù)细胞的细胞周期4.细菌(xìjūn)细胞的细胞周期第三节细胞周期长短(chángduǎn)的测定及细胞周期同步化放射性同位素脉冲(màichōng)标记法测定细胞周期长短流式细胞仪可以(kěyǐ)检测细胞DNA的含量,通过检测细胞不同时期DNA含量的变化,可以(kěyǐ)测定细胞周期的长短。3、缩时摄像技术可以得到(dédào)准确的细胞周期时间、分裂间期和分裂期的准确时间。细胞周期同步化1.选择(xuǎnzé)同步化2)细胞沉降分离法:M期细胞体积大,可用离心的方法分离。同时期的细胞体积不同(bùtónɡ),而细胞在给定离心场中沉降的速度与其半径的平方成正比,因此可用离心的方法分离。其优点是可用于任何悬浮培养的细胞,缺点是同步化程度较低。1)DNA合成阻断法:选用(xuǎnyòng)DNA合成的抑制剂(TdR和羟基脲HU),可逆地抑制DNA合成。常用TdR双阻断法:处于对数生长期细胞的培养基中加入过量TdR(HeLa2mol/L;CHO7.5mol/L),S期细胞被抑制。移去TdR,释放时间大于S期的时长时,再次加入过量TdR,细胞停在G1/S交界处。优点:同步化程度高缺点:产生(chǎnshēng)非均衡生长,个别细胞体积增大。