第四章动物细胞的培养一、培养基得基本要求2、促生长因子及激素3、渗透压4、pH5、无毒、无污染二、天然培养基天然培养基:指来自动物体液或利用组织分离提取得一类培养基。如血浆、血清、淋巴液、鸡胚浸出液等。但就是由于天然培养基制作过程复杂、批间差异大,因此逐渐为合成培养基所替代。目前广泛使用得培养基就是血清,另外各种组织提取液、促进细胞贴壁得胶原类物质在培养某些特殊细胞液就是必不可少得。血清得主要成分与作用12血清得质量标准微生物检测血清得质量标准血清得外观血清得使用与储存使用血清得优缺点三、合成培养基三、合成培养基基本培养基种类如何选择培养基培养基得配制无血清培养基无血清培养基得基本配方酶抑制剂:培养贴壁生长得细胞,需要用胰酶消化传代,在无血清培养基中必不可少须含酶抑制剂,以终止酶得消化作用,达到保护细胞得目得,最常用得就是大豆胰酶抑制剂。结合蛋白与转运蛋白:转铁蛋白与牛血清蛋白。牛血清蛋白得添加比较大,可增加培养基得粘度,保护细胞免受机械损伤。许多旋转式培养得无血清培养基都含有牛血清白蛋白。微量元素:硒就是最常见得。无蛋白培养限定化学成分培养基(CDM)四、其她培养用液平衡盐溶液(BSS)消化液消化液胶原酶溶液胶原酶在上皮类细胞原代培养时经常使用,胶原酶作用得对象就是胶原组织,因此不容易对细胞产生损伤。胶原酶得使用浓度为0、1-0、3mg/L或200000U/L,作用得最佳pH6、5胶原酶不受钙离子、镁离子及血清得抑制,配制时可以PBS。pH调整液抗生素五、培养物得污染及防止真菌污染对细胞得影响及污染物得检测