菌种的衰退复壮(fùzhuàng)和保藏一、菌种的衰退(shuāituì)菌种衰退(shuāituì)的表现实践中关于防止(fángzhǐ)菌种衰退二、菌种的复壮(fùzhuàng)实践中复壮(fùzhuàng)方法三、菌种的保藏(bǎocáng)原理(yuánlǐ)：国际重要(zhòngyào)菌种保藏机构中国(zhōnꞬꞬuó)菌种保藏单位/工业(gōngyè)微生物菌种保藏技术菌种保藏(bǎocáng)方法冷冻(lěngdòng)保藏普通冷冻(lěngdòng)保藏技术(-20℃)应注意的是经过一次解冻的菌株培养物不宜再用来保藏。保藏过程中应注意控制保藏温度，培养瓶或试管应严格密封。这一方法虽简便易行，但不适宜(shìyí)多数微生物的长期保藏。超低温冷冻(lěngdòng)保藏技术(-60一-80℃)液氮冷冻保藏(bǎocáng)技术(二)液氮冷冻保藏(bǎocáng)微生物菌种的步骤1．待冷冻保藏(bǎocáng)菌种悬液的制备冻干(dònꞬꞬàn)保藏培养物的冻干(dònꞬꞬàn)过程配制保护剂传代(chuándài)保藏操作方法1、斜面保藏法将菌种转接在适宜固体斜面培养基上，待其充分(chōngfèn)生长后，用牛皮纸将棉塞部分包扎好（棉塞换成胶塞效果更好），置4C˚冰箱中包藏。保藏时间依微生物的种类而定。霉菌、放线菌及芽孢菌保存2－4个月移种一次，酵母菌间隔两个月，普通细菌一个月，假单胞菌两周传代一次。此法优点是操作简单、使用方便，缺点是保藏时间短、易被污染。2、液体石蜡保藏法将无菌石蜡加在已长好菌的斜面上，其用量以高出斜面顶端1CM为准，使菌种与空气隔绝。将试管直立，置低温或室温下保存。此法实用且效果较好。霉菌、放线菌、芽孢菌可保藏两年以上，酵母菌可保藏1－2年，普通细菌(xìjūn)也可保藏1年左右。3、穿刺保藏法按穿刺接种方式培养菌种，菌种长好后用胶塞封严，置4℃冰箱存放。载体(zàitǐ)法（4）将要(jiāngyào)保存的斜面菌种制成浓细胞悬液(≥106/ml)，用灭菌滴管或吸管吸取孢子悬液滴入无菌沙土上，每管约0.3～0.5ml，用接种环将其混合均匀。也可将真菌分生孢子用接种环从斜面直接挑取放入沙土中。/由于微生物的多样性，不同的微生物往往对不同的保藏方法有不同的适应性，迄今为止尚没有一种(yīzhǒnɡ)方法能被证明对所有的微生物均适宜。因此，在具体选择保藏方法时必须对被保藏菌株的特性、保藏物的使用特点及现有条件等进行综合考虑。对于一些比较重要的微生物菌株，则要尽可能多的采用各种不同的手段进行保藏，以免因某种方法的失败而导致菌种的丧失。参考书感谢您的观看(guānkàn)！内容(nèiróng)总结