会计学一、程序性细胞死亡PCD（programmedcelldeath）细胞凋亡与程序性细胞死亡蝌蚪尾的消失脊椎动物的神经系统的发育发育过程中手和足的成形过程2、简史1986年，RobertHorvitz等发现线虫中ced3（caspase），ced4（Apaf-1）是促凋亡基因。SydneyBrennerH.RobertHorvitzJohnSulston/王晓东：最年轻美国科学院院士(1)细胞皱缩变圆，微绒毛、复合体消失；出芽(budding)膜空泡化（blebbing)(2)胞质浓缩、细胞器结构保留（4）形成凋亡小体(4)凋亡小体形成胞膜皱缩内陷，分割包裹胞质(内含DNA物质及细胞器)，形成的膜包颗粒即凋亡小体（apoptosisbody）巨噬细胞吞噬凋亡小体三、PCD/细胞凋亡的生理和生化变化PCD/细胞凋亡与坏死的区别★细胞坏死(necrosis)细胞凋亡与细胞坏死是多细胞生物细胞死亡的两种不同形式，在形态学、生化代谢、分子机制、结局和意义等方面都有本质的区别。/三、胚胎发育中的程序性细胞死亡（PCD）（一）PCD参与了各器官的形态发生和发育。1、肢体的发生2、中枢神经系统的发生、发育3、腭的发生4、管（腔）道的形成5、晶状体的发育6、心的发育7、生殖细胞的发生8、免疫、造血系统的发生9、无用结构的退化消失（弓动脉、前肾、中肾、尾芽、鳃膜等）实验（二）胚胎发育中PCD的意义1、系统匹配淘汰没有作用或不再起作用的细胞，以确保有功能细胞的营养和空间。2、除去短暂结构：人胚尾芽3、雕刻躯体从而形成正常、精细复杂的生物体。4、保护机体：如胸腺的发育、损伤的胚胎细胞四、PCD/细胞凋亡的调节（三）PCD相关基因/蛋白的调节1、TNF死亡受体超家族（1）死亡受体：Fas、TNFRI等（2）与死亡受体有关的含死亡结构域的信号蛋白：FADD（FAS相关死亡蛋白）、TRADD（TNFRI相关死亡蛋白）等（1）死亡受体：Fas、TNFRI等结构特点：胞内C-端：胞内功能区由80个氨基酸构成的死亡结构域（deathdomain，DD）跨膜区胞外N-端：胞外功能区内含数个半胱氨酸（2）含有死亡结构域的信号蛋白TRADD（TNFR相关死亡蛋白）：34kD，C端的DD与TNFRI，FADD的DD结合FADD（Fas相关死亡蛋白）（MORT-1）：23kD，C-端含有一个DD(deathdomain)，可与Fas结合；N-端含有MORT结构域或死亡效应结构域（DED:deatheffectordomain），可与proCaspase-8（FLICE）的DED结合Fas(Apo-1,CD95):43kD（三聚体FasL-----Fas------FADD（Fas相关死亡蛋白）--------proCaspase-8）(DISC/死亡诱导信号复合物):活化Bid、caspase-3DED:deatheffectordomainTNFRI（TNFR55）：55-60kD，TNFRI-------TRADD（TNFR相关死亡蛋白）------FADD--------proCaspase-8Fas/FasL凋亡诱导因素2.凋亡蛋白酶Caspases激活的瀑布学说(级联反应)(3)结构特征④在大亚基的C端含有一活性中心，其中半胱氨酸是必需氨基酸。(4)Caspase的作用底物②核纤层（lamina）蛋白③细胞骨架蛋白：导致细胞解体，形成凋亡小体④其他的caspases⑤灭活细胞凋亡的抑制物3、凋亡蛋白酶活化因子-1（Apaf-1)130kD，N-端含有一半胱氨酸蛋白酶募集域（CARD），C-端由12个WD-40重复片段组成。凋亡体/死亡复合体：Cytc-Apaf-1-dATP（闭合的单体聚合成开放的七聚体）Cytc-Apaf-1-dATP-proCaspase-9凋亡复合体4、线粒体膜间隙蛋白（线粒体释放的凋亡相关因子）细胞色素C，凋亡诱导因子，Apaf-1,Ca2+,Smac/DIABLO等5、自由基活性氧自由基（超氧阴离子自由基、羟自由基及单线态氧，H2O2等）：诱导PCD的发生。活性氮自由基：NO—高浓度促PCD，低浓度抑制PCD6、P53基因P53的促凋亡机制：7、BcL-2家族/BcL-2基因家族成员自身或彼此之间有形成二聚体或多聚体的能力，BcL-2家族通过蛋白与蛋白相互作用调节着细胞的存活与凋亡。/Bcl-2（Bcelllymphoma/leukemia-2）：Bcl-2是第一个被确认有抗凋亡作用，由229aa构成（鼠236）分布在线粒体膜,内质网，核膜等处。Bcl-2和C.elegans中的