色谱法：采用多级化、层析(cénɡxī)化的高效分离技术。它不仅是复杂混合物的多组分分离技术，而且是色谱分析的基础。色谱(sèpǔ)文献1）什么是色谱技术？它哪几种形式？2）色谱分离过程中，柱内样品组分分子运动具有那些基本特征？3）试比较色谱分离与萃取、蒸馏等分离之间的区别？4）根据你所掌握的分析化学知识，比较色谱分析法与其他分析方法（化学分析、电分析、光谱分析等）的区别，说明色谱分析法在分析化学中的地位和作用。5）从分离效率(xiàolǜ)、分离速度、灵敏度、样品容量、操作技术等方面，列表比较经典液体柱色谱、气相色谱、高效液相色谱的异同点。9色谱(sèpǔ)绪论色谱(sèpǔ)历史1958年，Stein和Moore研制出氨基酸分析仪，确定了核糖核酸(hétánɡhésuān)的分子结构1967年，Horvvath和Huber等研制了高效液相色谱仪1975年，Small等提出离子色谱20世纪80年代，超临界色谱20世纪90年代，毛细管电泳（1809年Reŭss第一次电泳实验）21世纪，联用技术、大分子色谱分离、制备色谱可望取得更大的发展把菊根粉或白垩粉（CaCO3）装在玻璃管中，将植物叶子的石油醚提取液倒入管中，然后加入石油醚淋洗。随着淋洗进行，样品中各种色素向下移动的速度不同，逐渐形成一圈圈的连续(liánxù)色带。茨维特在当时的实验中观察到6个色带，它们分别是胡萝卜素、叶黄素和叶绿素A和B。1903年3月21日俄国植物学家茨维特（MichaelTswett，1872-1919）在华沙自然科学学会生物学会议上发表了“一种新型吸附现象(xiànxiàng)及其在生化分析上的应用”研究论文，介绍了一种应用吸附原理分离植物色素的新方法，并首先认识到这种层析现象(xiànxiàng)在分离分析方面有重大价值。1906年他在德国植物学杂志发表文章，首次命名上述分离后色带为色谱图，称此方法为色谱法（Chromatography）。1907年在德国生物学会年会上，展示过带有色带的分离柱管和纯化过的植物色素溶液。茨维特被世人公认为色谱创始人。茨维特工作的主要贡献◆（采用吸附色谱）成功分离了叶绿素a和叶绿素b◆提出/发明(fāmíng)了色谱法1931年，Kuhn采用柱色谱分离了类胡萝卜素，进一步确定了α-和β-胡萝卜素的同分异构体，以及分别从植物叶片和蛋黄中分离得到叶黄素，才使色谱法引起科学界的重视。Kuhn实验不仅证明了蛋黄叶黄素是氧化类胡萝卜素的混合物，而且证实了色谱法可以用来进行制备分离。获得1952年度的诺贝尔化学奖Martin和Synge的主要工作：采用水分饱和的硅胶作固定相，以含有乙醇的氯仿作流动相，甲基橙作显色剂（指示氨基酸的位置(wèizhi)）分离苯丙氨酸、亮氨酸、异-亮氨酸和脯氨酸-缬氨酸-蛋氨酸等三组氨基酸。☆首次提出分离过程的塔板理论，这是在色谱柱操作参数基础上模拟蒸馏理论，以理论塔板来表示分离效率，定量地描述、评价分离过程；☆在色谱过程中最早引入分配平衡取代吸附平衡，即采用分配色谱进行分离。该方法是针对逆流液-液萃取难题而发明的。即将一种液体(yètǐ)固定在适当的载体上，使第二种液体(yètǐ)流过前者而实现分离，这也是一个很重要的成就。☆提出了色谱法进一步发展最有远见的预言：一是“流动相可用气体来代替，对分离更有好处”；二是“使用非常细颗粒的填料和柱两端施加较大的压差，应能得到最小的理论塔板”。1952年，Martin和James发表第一篇气液色谱论文，首次用气体作流动相，配合微量酸碱滴定，发明了气相色谱，它给挥发性化合物的分离测定带来了划时代的革命。VanDeeter、Giddings等人对色谱理论的研究极大地促使色谱技术的发展。1955年，第一台商品气相色谱问世，标志着现代色谱分析的建立。1957年戈雷(Golay)发表“涂壁毛细管气液分配色谱理论和实践”论文，首先提出(tíchū)毛细管速率方程，并第一次实现了毛细管气相色谱分离。1979年弹性石英毛细管应用于气相色谱,将毛细管气相色谱推上高潮。80年代将固定液固载化是毛细管色谱技术的又一个重要发展。它大大提高了色谱柱的稳定性,延长了柱寿命,并使液膜进一步增厚,提高了色谱性能(如可在高温下使用)。Horvvath(1967)、Huber(1967)、Kirkland(1969)分别研制高效液相色谱仪，他们的主要贡献主要是技术上的突破：▲高效填料(tiánliào)：细颗粒、耐压；特别是键合固定相▲高压泵:克服细填料(tiánliào)带来的流速慢的缺点，加快了传质过程▲仪器检测：高灵敏度连续检测高效液相色谱的重要特征是由“开放柱液相色谱”向“密闭柱液相色谱”方向发展。1975年，Small,Stevens和B