2.2动物细胞工程.pptx
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会计学二、植物体细胞杂交24日下午,中国科学院神经科学研究所的孙强团队宣布,成功克隆出了两只食蟹猴。这是世界首个体细胞克隆猴。人类首次通过体细胞核移植的方式克隆出来的灵长类动物。常用的技术手段:★动物细胞培养★动物细胞核移植★动物细胞融合★单克隆抗体的制备1.动物细胞培养的概念细胞贴壁:悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上。培养贴附性细胞时,细胞要能贴附于底物上才能生长繁殖.细胞接触抑制取材4.动物细胞培养的条件(1)生产蛋白质生物制品:病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等(2)基因工程受体细胞的培养(3)用于检测有毒物质(根据变异率)(4)用于生理、病理、药理等方面的研究(5)培养健康细胞用于烧伤病人皮肤移植1.动物核移植的概念:电激处理使供体核进入受体卵母细胞构建重组胚胎1、受体细胞为减数第二次分裂中期的卵母细胞的原因?体细胞核移植技术的应用前景体细胞核移植技术存在的问题回顾一动物细胞培养2、受体细胞为减数第二次分裂中期的卵母细胞的原因?三、动物细胞融合1.概念:2、原理:3、诱导因素:仙台病毒4、过程5.意义:思考(二)单克隆抗体的制备骨髓瘤细胞动物细胞融合:细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径,但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中只有D途径,没有S途径,能无限分裂增殖。在培养液中加入氨基嘌呤后,使D合成途径阻断,仅有D合成途径的骨髓瘤细胞及其彼此融合的细胞就不能增殖,但人淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞,因为可以利用淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖。通常采用有限稀释克隆细胞的方法,将杂交瘤细胞多倍稀释,接种在多孔细胞培养板上培养,使每孔细胞不超过一个,再由这些单细胞分裂增殖,然后检测各孔上清液中细胞分泌的抗体,那些上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔。最终选出分泌预定特异抗体的杂交细胞株进行扩大培养。3、杂交瘤细胞有何特点?4、本过程利用的哪些技术?5、单克隆抗体的优点是什么?(三)单克隆抗体的应用(2)用于治疗疾病和运载药物1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合,得到杂交细胞,经培养可产生大量的单克隆抗体,与骨髓瘤细胞融合的是()A.经过免疫的B淋巴细胞B.没经过免疫的T淋巴细胞C.经过免疫的T淋巴细胞D.没经过免疫的B淋巴细胞巩固练习3.单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是()A.由小鼠能产生抗体的B淋巴细胞与肝细胞融合B.由小鼠一个B淋巴细胞诱导融合而成C.由小鼠一个B淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成D.由小鼠一个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成4.只能使动物细胞融合的常用诱导方法是()A.PEGB.灭活的病毒C.电刺激D.离心5.“生物导弹”是指()A.单克隆抗体B.杂交瘤细胞C.产生特定抗体的B淋巴细胞D.在单克隆抗体上连接抗癌药物