细胞工程动物组织与胚胎工程PPT课件.pptx
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第一节、组织工程器官保存培养:维持器官的存活与功能组织培养:体外培养生成某些(mǒuxiē)组织组织修复:通过培养组织、移植或原位地进行坏损组织的修复。修复缺损器官的方法一般(yībān)有自体移植、异体移植和组织代用器三种。1、人体(réntǐ)组织与器官的基本结构人体组织由细胞(xìbāo)及支撑细胞(xìbāo)的细胞(xìbāo)外间质构成extra-cellularmatrix)细胞(xìbāo)外间质组成包括:collagen,glycoprotein,hyaluronicacid,proteoglycan,elastin,fibronectin,growthfactors,cytokinesetc.2、组织工程(gōngchéng)的三要素细胞、支架、信号A、细胞必须能不断进行细胞分裂,且必须能被调控分化成特定(tèdìng)的组织细胞干细胞:胚胎干细胞、成体干细胞组织来源细胞自体或异体B、组织(zǔzhī)生长支架需求:(1)、生物亲和性(2)、生物可降解性(3)、三维内部连通孔隙(4)、具备支架强度。蛋白质支架(zhījià)多糖支架(zhījià)磷酸钙基生物材料硫酸钙基生物材料C、生长因子表皮生长因子:是对上皮细胞增殖(zēngzhí)有很强促进作用的53个氨基酸残基的多肽。神经生长因子:为神经细胞特异性分泌的营养蛋白。肝细胞生长因子:为728个氨基酸残基单链组成。骨形态发生蛋白:能诱导或刺激新骨的生成。3、技术路线(1)体外得到工程化组织、移植——目前主要的方式(2)细胞与支架前体混合注射体内(tǐnèi),原位形成凝胶支架,提供新组织形成的空间皮肤(pífū)修复骨修复(xiūfù)4、已取得成就第一个组织工程产品人工皮肤已于1997年3月经美国FDA批准上市。这种产品是器官基因公司培养出的,被称为"适移植"的活性皮肤,它由新生儿的包皮细胞培植而成,呈层状结构,与正常人的皮肤极为相似,能分泌人体皮肤胶原、生长因子和结构性蛋白,可与病人自身的皮肤很好地融合(rónghé),不存在排异作用,就连病人自身的血管和色素也会逐渐转移到"适移植"活性皮肤中去,愈后不留瘢痕。2000年3月10日,AdvancedTissueSciences公司宣布成功研制出促进心肌血管(xuèguǎn)形成的产品。该产品应用后14天即开始形成新的血管(xuèguǎn)。据悉,用来修复或取代受损的人体软骨组织的组织工程产品人工软骨也即将上市。第二节、胚胎工程胚胎工程(embryoengineering)是指所有对配子和胚胎进行人为地干预,使其环境因素、发育模式或局部组织功能,发生量和质的变化的综合技术(jìshù)。包括:胚胎移植、胚胎融合、胚胎分割、胚胎冷冻、胚胎性别鉴定、胚胎细胞核移植、转基因操作等一、胚胎(pēitāi)移植(embryotransfer)(一)、概念及应用胚胎移植(embryotransfer)也称受精卵移植,是指一头母畜(称为(chēnɡwéi)“供体”)发情排卵并经过配种后,在一定时间内从其生殖道(输卵管或子宫角)取出受精卵或胚胎,然后把它们移植到另外一头与供体同时发情排卵、但未经配种的母畜(称为(chēnɡwéi)“受体”)的输卵管或子宫角。这个来自供体的胚胎能够在受体的子宫着床,并继续生长和发育,最后产下供体的后代。“借劣质动物之腹怀优秀个体之胎”2.胚胎移植(yízhí)的应用范围2.1在家畜(jiāchù)改良方面的应用2.2在特定(tèdìng)品种扩繁上的应用2.3在动物生物(shēngwù)多样性上的应用2.4其它(qítā)方面应用(二)胚胎移植的生理基础(jīchǔ)及原则1.胚胎移植(yízhí)的生理学基础2.胚胎(pēitāi)移植的基本原则(三)、胚胎移植的技术(jìshù)程序1.供体和受体的选择(xuǎnzé)2.超数排卵处理(chǔlǐ)同期(tóngqī)发情与超排程序受体同期发情(fāqíng)处理3.供体母畜(mǔchù)的配种羊同期(tóngqī)发情——放栓供体超排处理(chǔlǐ)供体配种(pèizhǒng)4.胚胎(pēitāi)的收集/移胚配种(pèizhǒng)后3天的供卵巢供体羊胚胎(pēitāi)收集收集到的冲洗(chōngxǐ)液静置,冲洗(chōngxǐ)液分离。拣胚:将胚胎移至培养液或保存液中。胚胎鉴定:根据透明带、胚胎细胞、发育阶段及细胞在透明带中的比例确定胚胎级别。6天收集(shōují)的胚胎(未拣)二细胞(xìbāo)至四细胞(xìbāo)胚胎胚胎的降温:使胚胎停止发育,延长其体外生存时间体外培养(péiyǎng):将胚胎置于体温条件下,在培养(péiyǎng)液中,使其继续发育胚胎冷冻:通过一定的处理程序,将胚胎降温冷冻后,