第二章氨基酸Chapter2Aminoacid教学目标：第一节氨基酸（Aminoacid,AA)—蛋白质的构件分子ProteinArchitectureP123三.氨基酸的分类AAandclassification含羟基的氨基酸：Ser、Thr非极性氨基酸（1）不带电荷的极性氨基酸（三）.根据人体能否自身合成（二）非编码的蛋白质氨基酸:（四）非蛋白质氨基酸:第二节.氨基酸的重要理化性质（一）AA的光学活性和立体化学（二）氨基酸的光谱性质２、核磁共振波谱二.氨基酸的酸碱性质（P130）2.氨基酸的两性解离和酸碱滴定曲线Gly的两性解离和酸碱滴定曲线（2）等电点的计算对多氨基和多羧基氨基酸的解离解离原则：酸性氨基酸，以Asp为例：碱性氨基酸，以Lys为例：A中性氨基酸：pK1，为α—羧基的解离常数，pK2，为α—氨基的解离常数。pI=(pK1，+pK2，)/2酸性氨基酸：pK1，为α—羧基的解离常数，pK2，为侧链羧基的解离常数。pI=(pK1，+pK2，)/2碱性氨基酸：pK2，为α—氨基的解离常数，pK3，为侧链氨基的解离常数。pI=(pK2，+pK3，)/2等电点与该离子浓度无关，只决定于两性离子两侧的Pka值。氨基酸的两性解离性质及等电点（pI）1.某氨基酸的等电点即为该氨基酸两性离子两边的pK值和的一半。2.在氨基酸等电点以上任何pH，AA带净的负电荷，在电场中向阳极移动；在氨基酸等电点以下任何pH，AA带净的正电荷，在电场中向阴极移动。3.在一定pH范围中，溶液的pH离AA等电点愈远，AA带净电荷愈多。实验证明在等电点时，氨基酸主要以两性离子形式存在，但也有少量的而且数量相等的正、负离子形式，还有极少量的中性分子。氨基酸在等电点状态下，溶解度最小。（一）α-氨基参加的反应NH2OHRCHCOOH+HNO2RCHCOOH+H2O+N2VanSlyke法测氨基氮（体积）的基础，N2中的1/2为氨基氮。含亚氨基的脯氨酸则不能与亚硝酸反应。苄氧甲酰氯、叔丁氧甲酰氯、对-甲苯磺酰氯、邻苯二甲酸酐—N=C=S+N—CH—COOH+4、与甲醛反应R’COOHR’COOC=O+H2NCHC=NCHHRHR（二）α-羧基参加的反应2、成酯NH2干燥，HClRCHCOOH+C2H5OH回流RCHCOOC2H5+H2OHN-保护基R—CH-COOH+PCl5HN-保护基R—CH-COOCl+POCl3+HCl3.脱羧基反应NH2脱羧酶R—CH-COOHR-CH2-NH2+CO2YNHONH2NH2R—CH—C—OCH3YNHOHNO2R—CH—C—NHNH2YNHOR—CH—C—N-—N+N+2H2O（三）α-羧基和α-氨基都参加的反应弱酸加热氨基酸与茚三酮反应2、成肽反应（四）侧链R基参加的反应侧链R基参加的反应—用于蛋白质的化学修饰Tyr酚基在3和5位上易发生亲电取代反应，如碘化和硝化Tyr+重氮苯磺酸橘黄色Arg侧链胍基在碱性硼酸钠缓冲液中与环己二酮生成缩合物。Trp侧链吲哚基能被N-溴代琥珀酰亚胺氧化——分光光度法测定Trp含量Met侧链上甲硫基：强亲核基团与烃化试剂成锍盐与二硫硝基苯甲酸发生硫醇-二硫化物交换Cys的巯基不稳定，易被氧化成二硫键巯基在有痕量的金属离子如：Cu2+，Fe2+，Co2+或Mn2+时，易被氧化。Cys中的二硫键可被氧化剂（过甲酸）以及还原剂（巯基化合物）打开。DTT苯环的黄色反应Folin一酚反应六、氨基酸混合物的分析分离{按两相所处状态分：柱吸附（2）纸层析双向纸层析图离子交换层析