细胞融合CellFusionxx201100140120同组者：xx2013年3月14号【实验目的】了解动物细胞融合的常用方法Learncommonmethodsofcellfusion学习用PEG进行细胞融合的基本操作过程UsePEGtoinducecellfusion注意动物细胞融合的过程中细胞的行为和变化Payattentiontotheactionandchangeofcellsduringtheprocessofcellfusion【实验原理】细胞融合是指把相同或不同类型的两个或多个细胞融合成一个具有共同细胞质和单一、连续细胞膜的细胞。Cellfusionisthattwoormorecells，ofsameordifferenttypes，befusedbycertaintechniquetoproduceonecellwithacommoncytoplasmandasinglecontinuouscellmembrane.目前用于细胞融合的有以下三种常用的方法：Virus病毒PEG聚乙二醇Electricshock电击通过结合化学和电击的方法，可以使细胞融合率高达70%Upto70%cellfusionefficienciesbycombiningbothchemicalandelectricalfusionprotocols.细胞融合率=已融合的细胞核总数/所有细胞的细胞核总数*100%Cellfusionefficiencyistheratioofthetotalnumberoffusednucleusoverthatofallthecellsinthevision，usuallyshownaspercentage.除了诱导剂外，其他因素，如细胞类型和性质、温度、PH值、离子强度等也会影响细胞融合率。Inadditiontoinducers，someotherfactors，suchascelltypeandnature，temperature，PHvalue，ionicstrengthetc，willalsoaffecttheefficiencyofcellfusion.聚乙二醇PEG，又名聚环氧乙烷PEO、聚氧乙烯POE，是一种具有重要商业价值的聚醚。Poly-ethylene-glycol，alsoknownaspoly-ethylene-oxide、polyoxyethylene，isakindofimportantpolyetherofgreatcommercialvalue.PEG分子能改变各类细胞的膜结构，使两细胞接触处质膜的脂类分子发生疏散和重组，改变接触处双分子层质膜的相互亲和以及彼此的表面张力作用，从而使细胞发生融合，产生体细胞杂合体。PEGmoleculecouldchangethemembranestructureofcellswhichmakesthelipidmoleculedisperseandrecombineatthepointofcontractbetweentwocells.Withthechangeoftheaffinityandthesurfacetensionofthelipidbilayeratthepointofcontract，cellfusionoccurs，producingsomaticcellhybrids.细胞融合技术的应用：applicationofcellfusion生产单克隆抗体productionofmonoclonalantibody基因定位Genemapping绘制人类基因图谱Human’sgeneticmap原生质体新培养体系Newculturesystemforprotoplast培育抗逆植株productionofadverse-resistantplants生物药品的生产productionofbiologicaldrug为发酵工程提供优良菌种providingstrainsforfermentationindustry【实验材料】试剂用Alsver液悬浮培养的鸡血细胞，0.85%的生理盐水，GKN溶液，50%PEG溶液仪器和工具盖玻片、载玻片、离心管、离心机、滴管、显微镜等【实验方法】向1ml血细胞悬液中加入4ml0.85%的生理盐水，清洗细胞，1000~1200r/min离心5min，弃上清。Add4ml0.85%physiologicalsalineinto1mlbloodcellsuspension，washthoroughlyandcentrifugefor5minutesat1000~1200r/min，discardsupernatan