基因芯片定量PCR的研究的开题报告一、研究背景随着基因芯片技术的发展，研究人员可以同时检测成千上万个基因表达的变化，同时呈现在一张芯片上，从而帮助人们更好的理解基因表达的调控机制以及分子发生的生物学意义。在基因芯片上发现不同基因表达之间的相互影响和调控关系，是揭示生物化学过程、认识疾病的机制和诊断和治疗该疾病的工具。随着定量PCR技术的发展，人们可以更加高精度、更低成本地测定基因的表达级别，同时，因为PCR技术的优越性以及可扩大性，它已被广泛应用于检测基因表达定量。基因芯片和定量PCR技术的结合，可以提高精度和高通量检测，同时，可以避免一些质量差的芯片数据造成的误导。二、研究目的本研究旨在建立一种基因芯片定量PCR的技术体系，应用于基因表达定量的研究中。使用基因芯片和定量PCR技术结合的方法可以提高基因表达的检测精度、灵敏度和特异性，同时可以实现高通量、高效和经济的检测。三、研究内容1.梳理基因芯片及PCR技术的原理和现状；2.建立基因芯片和定量PCR的技术体系；3.优化基因芯片和定量PCR的技术参数；4.测定基因表达定量的精度、灵敏度和特异性；5.对编码RNA和微小RNA进行基因表达定量的研究；6.对不同样本特征或不同疾病的样本进行基因表达分析比较。四、研究意义1.本研究通过基因芯片和定量PCR技术结合，可以提高基因表达的检测精度、灵敏度和特异性，同时可以实现高通量、高效和经济的检测，为基因表达的相关研究提供了一种新的方法。2.本研究的方法可以避免一些质量差的芯片数据造成的误导，提高实验的可重复性和科学性。3.本研究可为分子生物学相关学科的教学和生命科学领域的研究提供参考。五、研究方法1.实验室材料及设备：来自不同细胞和组织的RNA样品，定量PCR系统，基因芯片等。2.实验流程：(1)提取RNA并进行反转录PCR，选取代表性的样品用于基因芯片分析；(2)基因芯片分析：将旨在寻找特定基因的寡核苷酸探针定向探测芯片上成千上万个目的基因，检测其表达量和基因之间的调控关系；(3)确定需要量化的基因并设计引物；(4)建立定量PCR的反应体系，进行PCR扩增，并用基因芯片数据验证扩增结果；(5)测定基因表达定量的精度、灵敏度和特异性。六、预期成果1.确定一种基于基因芯片和定量PCR技术的检测方法，并建立稳定、高效、具有实际应用价值的实验流程；2.定量PCR扩增结果与基因芯片数据相吻合，表明本方法的可行性和可靠性；3.建立一套基于本方法研究编码RNA和微小RNA基因表达定量的实验流程，并开展实际应用研究；4.筛选出特定基因，在不同样本特征和不同疾病样本中的表达水平，并进行相关基因的表达分析。七、研究计划1.第一年：(1)学习基因芯片和定量PCR的基本理论知识；(2)确定实验设计和条件，并进行常用引物的定性检测；(3)进行RNA的提取和纯化，并进行基因芯片分析。2.第二年：(1)按照基因芯片分析结果，确定需要量化的基因，并设计合适的引物；(2)建立基于基因芯片和定量PCR技术的实验流程，对需要量化的基因进行定量PCR检测；(3)测定基因表达定量的精度、灵敏度和特异性。3.第三年：(1)进一步探究该方法在编码RNA和微小RNA基因表达定量方面的应用价值；(2)对不同样本特征和不同疾病样本的基因表达情况进行比较和分析；(3)编写毕业论文并答辩。