第7期(总第214期)农产品加工·学刊No.72010年7月AcademicPeriodicalofFarmProductsProcessingJul.文章编号：1671-9646(2010)07-0004-04谷氨酰胺合成酶产酶菌株的筛选及酶学性质刘川顺1，2，*李平1，李健2（1.同济大学生命科学与技术学院，上海200092；2.安徽农业大学茶与食品科技学院，安徽合肥230036）摘要：通过对枯草杆菌、黑曲霉、米曲霉3种菌株的筛选，得到3种菌株具有产谷氨酰胺合成酶（GS）的能力，其中米曲霉产酶能力较高，对米曲霉菌株进行紫外线诱变使其产酶能力提高了15.6%。确定了米曲霉最佳超声波破碎条件为：功率400W，工作1s，间歇3s，超声20min。谷氨酰胺合成酶的最佳酶促反应时间为30min，最适pH值为6.5，最适温度为60℃，并且得出了Mg2+和Mn2+对维持酶活至关重要。关键词：谷氨酰胺合成酶；米曲霉；紫外诱变；酶学性质中图分类号：TQ925+.9文献标志码：Adoi：10.3969/jissn.1671-9646(X).2010.07.001ScreeningandEnzymePropertyofEnzyme-producingStrainsLiuChuanshun1，2，*LiPing1，LiJian2（1.SchoolofLifeScienceandTechnology，TongjiUniversity，Shanghai200092，China；2.CollegeofTea&FoodSciencesandTechnology，AnhuiAgriculturalUniversity，Hefei，Anhui230036，China）Abstract：ByscreeningBacillussubtilis，AspergillusnigerandAspergillusoryzae，threekindsofstrainshaveproductedtheabilityofglutaminesynthetase(GS)，inwhichAspergillusoryzaehasthehigherproductionabilityofenzyme，itsproductioncapacityofenzymeisimproved15.6%byultravioletmutagenesisofAspergillusoryzaestrains.ThebestultrasonicfragmentationconditionsofAspergillusoryzaearedetermined：thepower400W，theworktime1s，theintervaletime3s，theultrasoundtime20min.ThebestenzymereactiontimeofGSis30min，pH6.5，thetemperature60℃，Mg2+andMn2+areessentialtomaintainenzymicactivity.Keywords：glutaminesynthetase；aspergillusoryzae；ultravioletmutagenesis；enzymaticproperties谷氨酰胺合成酶（glutaminesynthetase，GS；发酵菌株，也是多种酶的生产菌株，具有产谷氨酰胺EC6.3.1.2）是生物体中最古老、存在最广泛的酶[1]，合成酶的能力。米曲霉是美国食品与药物管理局和美参与许多生物体的氮代谢和碳代谢。它是生物体氮代国饲料公司协会1989年公布的40余种安全微生物菌谢的关键酶之一，而氮的同化作用是生物体维持生命种之一[5]。HashimotoT等人[6]（1999年）报道米曲霉所必需的，因此该酶及基因在细菌、真菌、植物体中的菌丝由多细胞组成，是一类产复合酶的菌株，除产得到了广泛研究[2-3]。它可催化下式的反应：蛋白酶外，还产纤维素酶、糖化酶、木聚糖酶、淀粉L-谷氨酸+氨+ATP=L-谷氨酰胺+ADP+无机酶和植酸酶等。目前微生物发酵生产谷氨酰胺合成酶磷酸。的菌株主要是节杆菌、棒杆菌等细菌，因此该曲霉菌它也是体外酶法转化合成茶氨酸的重要酶类之株的优化和发酵工艺的改进，可以为生产谷氨酰胺合一[4]，更是谷氨酰胺工业化生产中极其重要的催化剂，成酶开辟一条新途径。是非常有价值的物质，其需求量日益增多。材料与方法目前谷氨酰胺合成酶的生产方法主要是合成法和1发酵法。发酵法虽然在经济效益和产量上占有优势，1.1试验材料但是缺乏成本低、效率高和稳定性好的生产方法。因1.1.1菌种此菌株的选择及优化和发酵工艺的改进是目前发酵法黑