KCTD10特异抗体制备及其小鼠胚胎表达谱分析的中期报告本项目旨在制备针对KCTD10的特异性抗体，并通过小鼠胚胎的表达谱分析研究其功能及相关信号通路。目前，我们已完成以下工作：1.合成并纯化了KCTD10蛋白。我们利用原核表达系统生产了His-tag标记的KCTD10融合蛋白，并通过Ni-NTA亲和层析纯化得到了高纯度的蛋白。Westernblot结果表明，蛋白的分子量与理论预测值相符。2.免疫小鼠制备KCTD10特异性抗体。我们选择将KCTD10蛋白免疫小鼠，并通过ELISA筛选出了阳性免疫血清。Westernblot和免疫组化实验证明，该抗体能够特异性地检测KCTD10蛋白。3.分离小鼠胚胎并提取总RNA。我们从E12.5小鼠胚胎中分离出胚胎体，利用Trizol方法提取总RNA。4.通过RT-qPCR初步分析了KCTD10在小鼠胚胎发育过程中的表达变化。我们以GAPDH为内参，利用SYBRGreenI染料进行RT-qPCR实验，发现KCTD10在小鼠胚胎发育过程中呈现升高趋势。目前，我们正在进行以下工作：1.通过Westernblot和免疫组化进一步验证抗体的特异性和敏感性。2.利用RNA-Seq技术对小鼠胚胎的全基因表达谱进行分析，探究KCTD10在小鼠胚胎发育过程中的调控作用及相关信号通路。3.尝试利用CRISPR/Cas9技术构建KCTD10基因敲除小鼠模型，并进一步研究KCTD10的生物学功能及其与其他信号通路的相互作用。总体来说，我们已初步完成了本项目的一些关键任务，正在继续深入开展后续工作。