正交实验法优选长白山野生越橘中花色苷的提取工艺【摘要】目的优选长白山高寒地区野生越橘中花色苷的最佳提取工艺。方法以越橘中花色苷的纯度以及总固体得率为指标,采用正交实验法，优选提取工艺。结果越橘中花色苷的最佳提取工艺：提取次数3次,提取料液比1∶5(g∶ml)，提取温度为60℃，提取时间30min。结论此提取工艺合理可行,适用于提取越橘中的花色苷。【关键词】正交实验法越橘花色苷提取工艺Abstract:ObjectiveTooptimizetheextractionprocessofanthocyaninfromVacciniumuliginosuminChangBaiShanregion.MethodsOrthogonaltestwasusedforselectingtheoptimumofextractionprocessbytheindexesofanthocyaninpurityandtotalsolid3times,30mineachtime,fivefoldvolumeofwater,temperature60℃,wasconsideredastheoptimumextractionselectedtechnologyisreasonableandfeasible,andwassuitableforanthocyaninextraction.Keywords:Orthogonaltest;Vacciniumuliginosum;Anthocyanin;Extractionprocess越橘，是越橘科越橘属的落叶或常绿灌木，属杜鹃花科植物，产于我国吉林、黑龙江、内蒙古等地，其果实可酿酒或制果浆，小浆果蓝色或紫色，是联合国粮农组织推荐的人类5大健康食品之一，富含维生素E和黄酮类色素以及铁、锰等微量元素，果实中的花色苷具有改善视力、延缓衰老、抗疲劳、抗癌和抗炎作用［1］。由于越橘的生长环境，种类的不同，它所含有的花色苷量不同。本研究就长白山高寒地区野生越橘中花色苷的提取进行探讨。1仪器与材料1仪器及试剂721可见分光光度计，HH-601型超级恒温水浴锅，组织破碎机，SHZ-D循环水式多用真空泵，PH050电热干燥箱，T6新世纪紫外可见分光光度仪。乙醇和浓HCl，均为分析纯，北京化工厂生产。2药材长白山野生笃斯越橘，８月份采收，鲜果冻存。2方法与结果越橘中花色苷的制备方法［2～6］工艺流程冷冻越桔→破碎→溶剂提取→真空抽滤→花色苷提取液→纯化→花色苷越橘中花色苷含量测定光谱扫描确定测量最佳波长扫描条件：扫描范围200～700nm，扫描间隔nm，最佳波长为535nm。扫描光谱见图1。计算方法按照文献［1,2,5］等的方法计算长白山越橘中花色苷的含量。Acy(mg/100g)=TODE535/101%1cm=TOD=OD×DV×10D/SV×TEV×1Acy为anthocyanin的缩写，TAcy表示总花色苷含量(mg/100g越橘鲜果)，TOD表示总吸光度值，ε表示为当某一花色苷质量体积为1%时，在535nm下的吸光度值。本实验条件下各种花色苷在文中所用的提取溶剂中，ε为。OD表示吸光度值；DV表示样品稀释总体积；m表示鲜果质量。图1越橘中花色苷的扫描光谱正交实验设计正交实验设计根据药物的性质，以测定越橘中花色苷的总固体得率及纯度为指标，以95%乙醇和/LHCl(85∶15)pH作为提取溶剂［2］，用正交实验优选越橘中花色苷提取工艺。根据预试验结果，选取影响提取效果的因素和水平，实验方案见表1。表1长白山高寒地区越橘中花色苷提取的影响因素样品溶液的制备按L9(34)实验列号各条件分别对提取时间，提取温度，料液比，提取次数进行优选。见表2。总固体得率的测定精密量取样品液50ml，称量重量，按实验条件进行提取，40℃挥发溶剂，直至100ml转移至称重的蒸发皿中,水浴蒸干后，至干燥箱内80℃干燥，于干燥器内冷却，精密称重，至恒重，计算提取的固体量。结果见表2。表2正交实验结果含量测定精确称取花色苷固体物g，于50ml容量瓶中用提取溶剂溶解，于535nm测吸光度，按“”项下方法计算花色苷含量，计算固体提取物中花色苷的纯度。实验数据与方差分析见表3。表3方差分析结果结果分析比较各因素的极差值可以看出,影响提取效果的因素顺序为D>C>B>A，其中提取次数对花色苷的提取纯度影响最大，越橘中花色苷较优的提取工艺为D3C3B2A1，即提取次数3次，提取料液比1∶5，提取温度60℃，提取时间30min。3讨论本实验以最大限度地提取药材中的有效成分,避免有效成分的分解流失和无效成分的溶出为原则，进行了越橘中花色苷的提取工艺研究。通过扫描光谱确定最佳波长为535nm，与有关文献［2,5］报道的接近。采用酸性溶剂提取［7］和低温挥发可以有效的降低花色