会计学主要(zhǔyào)内容第一节概述染色体工程是按人们需要，添加，削减或替换生物(shēngwù)染色体的技术，根据操作对象的不同，分为动物染色体工程和植物染色体工程。染色体组工程改变染色体组数的技术。如单倍体转变为多倍体，三倍体西瓜细胞质工程又称细胞拆合工程，是通过物理或化学方法将细胞质与细胞核分开(fēnkāi)，再进行不同细胞间核质重新组合，重新建成新细胞细胞融合工程是利用自然或人工的方法使两个或几个不同细胞融合为一个细胞的过程根据研究对象(duìxiàng)不同，细胞工程可分为动物细胞工程植物细胞工程微生物细胞工程2、细胞工程的发展(fāzhǎn)细胞工程的发展(fāzhǎn)动物细胞工程(gōngchéng)起源于疫苗的生产，1920-1950年，开发出病毒或细菌疫苗1951年开发能促使动物细胞体外培养技术50年代以后开始大规模培养动物细胞生产生物制品70年代基因基因重组和杂交瘤技术的研究1982年重组人胰岛素研究成功，标志着细胞工程(gōngchéng)商业化的开始细胞工程的发展前景过程(guòchéng)//细胞(xìbāo)分化和全能性爪蟾的细胞核移植(yízhí)实验，证明细胞核的全能性4.细胞工程的相关(xiāngguān)技术无菌操作(cāozuò)技术无菌操作室的灭菌(mièjūn)与消毒缓冲(huǎnchōng)间培养(péiyǎng)器材的消毒细胞培养技术(jìshù)预想的克隆人技术(jìshù)路线/初代培养最初建立的外植体的无菌培养阶段继代培养将已形成愈伤组织或已分化(fēnhuà)出根、茎、叶、花等的培养物重新切割，转移到新的培养基上以进一步扩大培养试管苗通过组织培养所获得的再生植株植物细胞工程的基础(jīchǔ)技术植物(zhíwù)组织培养应用植物(zhíwù)组织培养的研究意义培养(péiyǎng)环境条件炼苗的原因(yuányīn)种质资源(zīyuán)的保存获得(huòdé)单倍体植株、缩短育种年限3.单细胞分离(fēnlí)技术机械(jīxiè)法酶解法(jiěfǎ)4.植物体细胞(xìbāo)杂交第三节动物细胞工程(gōngchéng)动物细胞工程(gōngchéng)理论基础动物细胞工程(gōngchéng)技术手段剪碎组织(zǔzhī)接种(jiēzhòng)组织块移入培养箱中（注意(zhùyì)贴有组织块的一面朝上），24～48小时后若培养液变成黄色且混浊，表示已被污染；若培养液变成紫色，一般细胞生长不好(bùhǎo)，则培养液pH过高；若培养液显为橙黄、橘红且清澈，一般显示细胞生长良好。在相差显微镜下观察，若此时见细胞自组织边缘长出。继续培养3～5日，再换部分或全部培养液，待多数组织块的生长晕相接，小心挑掉组织块，继续培养3～4天，细胞贴满细胞培养瓶壁时便可进行传代培养。培养(péiyǎng)物的传代经典传代法冷冻(lěngdòng)保存(液氮)5%-10%的二甲亚砜(DMSO)10%玻璃化保护剂(PVS2)细胞融合的意义(yìyì)动物细胞融合有以下三条途径：病毒诱导(yòudǎo)融合化学诱导(yòudǎo)融合电激诱导(yòudǎo)融合常用的病毒：副粘液病毒(副流感病毒如仙苔病毒)、天花(tiānhuā)病毒、疱疹病毒等促融机制：靠病毒表面含有神经氨酸酶一些突起的作用化学诱导(yòudǎo)融合3.单克隆抗体(kàngtǐ)技术淋巴细胞杂交瘤技术：是将可以分泌单一抗体的淋巴细胞与可以无限增殖的骨髓瘤细胞融合，获得兼具两种细胞特性的杂交细胞。这种细胞可以大量增殖并产生纯一的抗体，即单克隆抗体。这一技术被誉为免疫学上的一次重大(zhòngdà)革命。单克隆抗体：由单一克隆的B淋巴细胞产生的抗单一抗原的高度特异性抗体，具有专一性强、质地均一、反应灵敏、可大规模生产等特点基本原理单抗制备(zhìbèi)流程/爪蟾的细胞核移植实验(shíyàn)，证明细胞核的全能性动物(dòngwù)克隆同种胚胎细胞克隆(kèlónɡ)动物异种体细胞克隆(kèlónɡ)动物