第三节动物细胞工程一、动物细胞培养二、核移植、胚胎移植三、动物细胞融合技术四、单克隆抗体动物细胞培养动物细胞工程动物细胞工程常用的技术手段有动物细胞培养、动物细胞融合、单克隆抗体、胚胎移植、核移植等。其中，动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。动物细胞培养许多动物细胞能够分泌蛋白质，如抗体等。但是单个细胞分泌的蛋白质的量是很少的，要获得大量的分泌蛋白就要借助于大规模的动物细胞培养了。动物细胞培养液：通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等；培养的动物细胞：大都取自动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织。动物细胞培养方式：原代培养、传代培养动物细胞培养2、动物细胞培养的应用和概念：3、动物细胞培养过程：3、动物细胞培养过程：动物细胞的培养过程原代培养：初代培养亦称“原代培养”。指将欲待进行体外无菌培养的组织或器官从母体取下后，经表面灭菌后，切成合适的小块，置于培养基上进行培养的过程。由于外植体是直接取自母体的，事前并未经过体外培养，因此将它们规定为第一代培养物。通过继代培养，其体外繁殖体可供作第二、第三乃至无数代的培养物。传代培养：继代培养亦称“传代培养”。将培养的动植物细胞、组织或器官乃至植物小植株从原来的培养基上转移到一种新鲜的培养基上继续培养的过程称为继代培养。它是培养物连续传代的一种方法，每转移培养一次即称为一代。因此按转移培养的次数确定继代培养的代数。通过继代培养可以使培养的细胞、组织或植物小植株能不断获得新鲜补充的营养物质，可以避免在原培养基中所积累的一些有毒物质对培养物的不利影响，从而可以使培养物不断生长和增殖。概念细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到40~50代，这种传代细胞为细胞株。细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。细胞株和细胞系的区别：细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。思考讨论：在动物细胞培养过程中，为什么要用胰蛋白酶对取出的动物组织进行处理？3.动物细胞培养的条件（1）生产蛋白质生物制品如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体Vero细胞和狂犬病毒的培养工艺植物组织培养和动物细胞培养的比较植物组织培养和动物细胞培养的比较植物组织培养和动物细胞培养的比较植物组织培养和动物细胞培养的比较植物组织培养和动物细胞培养的比较植物组织培养和动物细胞培养的比较思考：二、动物体细胞核、胚胎移植技术和克隆动物胚胎移植技术胚胎移植技术克隆技术多莉克隆牛体细胞核移植技术的应用前景(1)遗传素质完全一致的克隆动物将更有利于开展对动物(人)生长、发育、衰老和健康等机理的研究；有利于大量培养品质优良的家畜;经转基因的克隆哺乳动物，将能为人类提供源源不断的廉价的药品、保健品以及较易被人体接受的移植器官；(4)科学家将很快地从目前的同种克隆技术推进到异种克隆,即借腹怀胎的新领域,这无疑将大大促进对濒临灭种的哺乳动物的保护工作。三、动物细胞融合动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理是相同的，诱导融合的方法也相类似，动物细胞的融合还常常用到灭活的病毒作为诱导剂。很多不同种类的动物细胞之间或动物与人的细胞之间都能进行融合，形成杂种细胞，例如人—鼠、人—兔、人—鸡、人—蛙、鼠—鸡、鼠—兔、鼠—猴等的细胞都能进行融合。动物细胞融合技术最重要的用途，是制备单克隆抗体。细胞融合是用自然或人工方法，使两个或更多个不同的细胞融合成一个细胞的过程。植物细胞由于具有细胞壁，在进行人工诱导融合之前，必须先脱除其细胞壁释放出原生质体才能进行融合。动物细胞可直接用于融合。人工诱导动物细胞融合的方法有病毒诱融法、化学诱融法和电刺激诱融法等。植物原生质体人工诱融法见“原生质体融合”。细胞融合过程应包括核基因和胞质基因(如线粒体和叶绿体基因)的融合。动物细胞融合动物细胞融合细胞A用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程细胞融合与融合诱导细胞融合物质动物细胞融合动物细胞融合（总结）动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的有（）A．诱导融合的方法完全相同B．所用的技术手段完全相同C．所采用的原理完全相同D．都能形成杂种细胞四、单克隆抗体在动物发生免疫反应的过程中，体内的每一个B淋巴细胞分泌一种特异性抗体。因此，要想获得大量的单一抗体，必须用单个B淋巴细胞进行无性繁殖，也就是通过克隆，形成细胞群，这样的细胞群就有可能产生出化学性质单一、特异性强的抗体——单克隆抗体。免疫系统是由机体内的淋巴细胞组成的，包括T淋巴细胞和B淋巴细胞。抗原(如病毒、细菌等非自身物质)进入身体后，