2基因工程常用工具酶2.1限制性核酸内切酶2.1.1限制性核酸内切酶的发现噬菌体侵染细菌2.1.1.2R-M系统2.1.1.3限制性内切酶的发现2.1.2限制性核酸内切酶的分类EcoRI2.1.4限制性核酸内切酶的活性单位识别序列EcoRⅠ三种酶切末端同裂酶和同尾酶5’-GGATCC-3’3’-CCTAGG-5’星活性2.1.7限制性核酸内切酶的应用2.2甲基化酶(methylase)2.3DNA连接酶（ligase）2.3.1DNA连接酶作用特点2.3.3基因工程常用连接酶DNA聚合酶Ⅰ在DNA复制过程中的作用DNA聚合酶Ⅰ和Ⅲ的比较主要的DNA聚合酶2.4.1大肠杆菌DNA聚合酶I2.4.1.3DNA的切口平移（nicktranslation）2.4.1.4DNA杂交探针的制备探针（probe）2.4.2KlenowKlenow2.4.3TaqDNA聚合酶(Thermusaqraticus)2.4.7反转录酶（reversetranscriptase）2.5末端脱氧核苷酸转移酶2.6磷酸酶和磷酸激酶2.7单链核酸内切酶（nuclease）2.1.1限制性核酸内切酶的发现2.2甲基化酶(methylase)2.3.3基因工程常用连接酶2.5末端脱氧核苷酸转移酶