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医学微生物学噬菌体?感染细菌,真菌,放线菌或螺旋体等微生物的病毒;蛋白质衣壳+核酸;能通过细菌滤器;专性胞内寄生,严格的宿主特异性。噬菌体分布极广,与细菌同在。用途细菌的鉴定分型,追查传染源,感染治疗。外源基因的载体,核酸复制,转录,表达。形态结构:蝌蚪形,微球形,细杆形。化学组成:蛋白质与核酸。核酸类型:DNA或RNA。有抗原性,抗体能抑制对宿主菌感染。抵抗力比一般细菌繁殖体强:耐冷,热70℃30’,抗脂溶剂,耐消毒剂。紫外线敏感10-15’。过饱和氯化钙溶液存活数年。噬菌体形态结构第二节毒性噬菌体毒性噬菌体的复制周期-四个阶段吸附表面蛋白与宿主菌受体特异结合过程。穿入尾部释放溶菌酶,尾鞘收缩注入核酸。生物合成转录mRNA,翻译酶,调节蛋白,结构蛋白;以噬菌体核酸为模板复制大量代核酸。成熟与释放按程序组装成熟的子代噬菌体。宿主菌裂解,释放出噬菌体,感染新宿主菌。噬菌体感染大肠杆菌噬菌体的培养与检测噬菌体裂解宿主菌,使混浊菌液变清。噬斑:将适量噬菌体和宿主菌液混合,在固体培养,培养基表面出现透亮的溶菌空斑,每个空斑系由一个噬菌体复制增殖并裂解宿主菌后形成的。噬斑形成单位:不同噬菌体噬斑的形态与大小不尽相同。通过噬斑计数,可测知一定体积内的噬菌体数量。第三节温和噬菌体温和噬菌体存在状态:细胞外:游离的具有感染性的噬菌体颗粒;宿主菌细胞质内:类似质粒,自由状态;整合在宿主菌染色体上-前噬菌体。溶原性:温和噬菌体具有的产生成熟子代噬菌体和裂解宿主菌的潜在能力。溶菌性周期-烈性噬菌体溶原性转换噬菌体的感染,带入了外来基因,可导致细菌基因型和性状发生改变。β-棒状杆菌噬菌体,携带白喉毒素基因,感染白喉棒状杆菌后,产素能力。肉毒杆菌-肉毒毒素。金葡菌-葡萄球菌溶素。溶解红细胞,白细胞,血小板。第五章细菌的遗传保证了物种的稳定性。细菌的变异能产生变种或新种,利于物种的进化。特定基因表现出来的各种性状-表型。变异基因型变异-遗传性变异。表型变异-非遗传性变异。基因型和表型变异的比较染色体,质粒,转座因子,整合子,噬菌体。一细菌的染色体一条环状dsDNA,聚成密集区-类核。4.6×106bp,4000个基因,一个起始位点。由功能相关基因组成操纵子,转录一条mRNA,然后分别合成自己的蛋白。连续基因,无内含子,转录后不需要剪接。结构基因单拷贝,复制快。二质粒自我复制-复制子与染色体同步复制,紧密型质粒。非同步松弛型质粒。编码某些特定性状:致育性质粒,耐药性质粒,致病性质粒。自行丢失与消除:非必须遗传物质。在细菌间转移:结合,转化,转导。相容性:结构功能相似质粒同一宿主菌。质粒种类致育质粒-F质粒:结合功能,性菌毛F+F-。耐药性质粒:R质粒-结合传递性质粒;非结合传递性质粒-转导。毒力质粒-Vi质粒:编码毒素,肠毒素。细菌素质粒:Col质粒大肠菌素。代谢质粒:沙门菌发酵乳糖酶由质粒决定。质粒(plasmid):三转座因子细菌基因组中能移动的一段DNA序列。发生在同或不同染色体及质粒。转座酶。插入序列IS小,750~1550bp。最简单的转座因子,两端有反向重复序列作为重组酶的识别位点,中心编码转座酶。转座子Tn(transposon):大,结构复杂,2000~25000bp,两端为IS中心序列,有与转位无关基因如:毒素基因,耐药基因。无关基因随转座子转座发生重组,突变。常见的插入序列和转座子四整合子(integron,In)运动性的DNA分子,独立结构,可捕获和整合外源性基因,转为功能性表达单位。定位于细菌染色体,质粒或转座子上。基本结构:两端为保守末端,中间为可变区,含一个或多个基因盒。含有3个功能元件:重组位点,整合酶基因,启动子,均位于整合子5’末端。通过转座子或接合性质粒,使多种耐药基因在细菌中进行水平传播。五噬菌体基因组第二节细菌基因表达的调控第三节基因的转移和重组转化(transformation)供菌死亡时释放的DNA片段,被受菌直接摄取,受菌获得新的性状。影响转化的因素:供菌和受菌基因型:亲缘关系近,转化率高。DNA片段小于1*107,10-20个基因。受菌生理状态感受态时摄取转化因子,感受态菌体带正电荷,细胞膜通透性高。环境因素:Mg2+,Ca2+等可促进转化。接合(conjugation)通过性菌毛相互连接沟通,将供菌DNA转给受菌,受菌获得供菌的性状。能通过结合方式转移的质粒称为结合性质粒,如:F质粒和R质粒。F质粒fertilityfactor-致育因子的结合F质粒与染色体整合称为高频重组菌株-Hfr,具有高频率转移自身染色体至F-菌的能力。通