会计学植物原生质体培养和细胞融合原生质体(protoplast)：脱去细胞壁、裸露的细胞。又称原生质球原生质体是为质膜所包围的裸露细胞。Protoplastsystem植物细胞育种中的核质替换细胞质杂种的获得远缘杂交创造新物种细胞细胞器的互作研究植物原生质体的分离和培养用于分离原生质体的材料机械分离法：先将细胞放在高渗糖溶液中预处理，待细胞发生轻微质壁分离，原生质体收缩成球形后，再用机械法磨碎组织，从伤口处可释放出完整的原生质体。酶解分离法：指将材料放入能降解细胞壁的混合等渗酶液中保温一定时间，在酶液的作用下，细胞壁被降解，从而获得大量有活力的原生质体的方法。酶酶酶解法的优缺点沉降法飘浮法沉降法又称界面法，采用两种密度不同的溶液形成不连续梯度，通过离心使原生质体与破损细胞分别处于不同液相中，从而纯化原生质体的方法。优点：可以收集到数量较大的纯净原生质体，同时避免收集过程中原生质体因相互挤压而破碎。///原生质体鉴定原生质体活力测定原生质体活力测定原生质体活力测定影响原生质体数量和活力的因素酶的种类、组合、浓度材料pH光照和温度渗透压稳定剂质膜稳定剂液体浅层培养法双层培养法——液体-固体双层培养法固体薄层培养法琼脂糖珠培养影响原生质体培养的因素影响原生质体培养的因素原生质体再生过程细胞壁再生是细胞分裂的先决条件细胞分裂原生质体类型第二节原生质体融合及培养/原生质体融合（protoplastfusion)诱导原生质体融合的方法NaNO3融合法高pH-高浓度钙离子融合法PEG融合法PEG融合技术的要点/电融合电融合/电融合融合类型影响原生质体融合的因素融合体类型植物体细胞的杂交过程细胞质工程(cytoplasmicengineering)细胞质工程细胞质工程体细胞杂种产生的其它途径细胞器移植细胞核移植细胞核的来源植物组织－机械法（加TritonX-100）－过滤离心原生质体－低渗涨破(加TritonX-100)－过滤离心细胞核的纯化Percoll或蔗糖密度梯度离心细胞核的转移夹层离心法：原生质体－核－原生质体－核∙∙∙PEG诱导电场诱导和微注射体细胞杂种产生的其它途径体细胞杂种选择及杂种植株鉴定体细胞杂种选择及杂种植株鉴定体细胞杂种选择及杂种植株鉴定互补选择法原生质体体细胞杂种选择及杂种植株鉴定体细胞杂种选择及杂种植株鉴定体细胞杂种选择及杂种植株鉴定体细胞杂种选择及杂种植株鉴定主要原因：生物基因的表达不是孤立的，它们之间是相互调控、相互影响的，所以马铃薯—番茄杂交植株的细胞中虽然具备两个物种的遗传物质，但这些遗传物质的表达受到相互干扰，不能再像马铃薯或番茄植株中的遗传物质一样有序表达，杂交植株不能地上长番茄、地下结马铃薯就是很自然的了。形似白菜味近甘蓝生长期短耐热性强易于储存P38思考与探究2小结小结思考题思考题