不规则抗体筛查微柱凝胶法方案设计.pdf
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不规则抗体筛查微柱凝胶法方案设计1.不规则抗体的概述不规则抗体是指ABO血型系统外的其他血型抗体,也称为不完全抗体,多为IgG类抗体。不规则抗体是引起临床输血反应的主要原因之一,输血前不规则抗体筛查有助于血液的选择,避免因为输注含有某抗体相应抗原的血液而引起严重的溶血性输血反应。临床为确保安全输血、诊断治疗新生儿溶血病等,对既往史有输血、妊娠、血液病及输过血液制品的所有受血者和供血者及孕妇等都要求常规检测不完全抗体以及受血者和供血者交叉配血是否相容。Coombs试验是最经典、最准确的检测不完全抗体(主要是1gG类)的方法,抗人球蛋白检测卡是基于Coombs试验研制的产品,是目前临床最常用的不完全抗体检测和交叉配血的方法。2.病例导入患者李某,女,36岁。2020-12-02因“停经7+月,阴道少量流血16+小时”收治医院产科,入院诊断“先兆早产”,予以卧床休息,抑制宫缩,营养胎儿,促胎肺成熟”等对症处理,于2020-12-10好转后要求出院;今半小时前突感下腹坠胀,伴阴道流出大量水样液体,随之感下腹阵发性胀痛,未伴阴道流血,自觉胎动可。门诊以:“足月妊娠临产”收住院。查体体温36.7℃,脉搏74次/分,呼吸18次/分,血压119/81mmHg。无发热、咳嗽、气促、鼻塞、流涕等。3.检验方案不规则抗体筛查(微柱凝胶法)4.不规则抗体筛选检测(微柱凝胶法)4.1检查仪器和试剂低速离心机(见下图)TD—A型医用离心机(见下图)FYQ型免疫微柱孵育器(见下图)不规则抗体筛检卡(见下图)不规则抗体筛检试剂(见下图)4.2检验原理将排阻层析和抗人球蛋白试验相结合,在微柱凝胶介质中,红细胞抗原与相应的不完全抗体在抗人球蛋白的作用下发生凝集反应,形成不能通过凝胶间隙而浮于凝胶表面或悬于胶中的红细胞免疫复合物,如无相应的不完全抗体结合,则不能形成红细胞免疫复合物,离心后分散的红细胞可通过凝胶间隙而沉积在微柱腔的底部。4.3标本要求4.3.1采血管与抗凝剂:受血者血样为紫色帽采血管EDTA-K₂抗凝静脉血(浓度15g/L)。4.3.2采血量:抽取受血者静脉血1~2ml于专用管内。4.3.3标本接收与拒收:标本采集后应立即送检,检验人员接收时应仔细核对患者信息,标本类型与检查项目是否相符,观察标本是否有溶血、凝血情况等,如标本不合格应拒收,重新采集送检。4.4操作步骤4.4.1将试剂卡做好编号标记。4.4.2分离被检者血浆:将标本放入离心机离心,离心后将上层血浆分离出备用。离心时转速必须大于3000转/分,时间2-3分钟。4.4.3用低离子溶液将筛检红细胞或谱红细胞配成0.5%~0.8%浓度的红细胞悬液,分别加入标记好的微管中,各1滴(或50μL)。4.4.4分别立即加入被检者血浆1滴(或50μL)。4.4.5试剂卡加样后,放置于37°C的孵育箱中孵育,时间为15分钟。4.4.6使用专用的TD—A型医用离心机离心,离心时间5分钟,900rpm2分钟,1500rpm3分钟。4.4.7离心后取出来,用肉眼直接观察判断结果,并做好记录。4.5结果判断4.5.1阴性结果:离心后红细胞沉积于微柱凝胶的底部。4.5.1阳性结果:离心后特异性抗原抗体复合物浮在凝胶表面或上方。4.6检查结果(见下图)及分析4.6.1结果:不规则抗体一型阴性(-)、二型、三型阳性(+)。4.6.2正常范围:一型、二型、三型阴性(-)4.6.3分析:不规则抗体筛查阳性结果,提示可能会出现溶血的风险。之所以会出现这种情况,有两种原因,一种是ABO溶血,一种是Rh溶血。ABO溶血是比较常见的,当父母的血型与孩子的血型不合时,就容易出现溶血的情况,多见于母亲与孩子的血型不合。但是进行积极的抑制,就可以避免这种情况的产生,而Rh溶血的损伤较大,需要在孕期,积极的接种抗D免疫球蛋白。5.小结通过选择不规则抗体筛查作为毕业设计选题,深入的了解到不规则抗体的注意事项,以及有关实验室检查原理和步骤,更加进一步的了解血库的工作日常和流程,也提高自身的操作能力,理论与实际相结合的连贯性,以及分析结果的能力和操作规范性,不规则抗体又称意外抗体是指血清中抗-A,抗-B以外的其他血型抗体。输血之前,鉴定其他血型的不规则抗体是极为重要的,因为不规则抗体会导致一-些不良反应,轻则发热,影响疗效,重则破坏红细胞或缩短寿命或死亡。也是诊断是否溶血的重要指标,对临床医生评估患者病情起重要作用。参考文献[1]汪小玲,梅礼军.不规则抗体筛查及特异性鉴定结果分析[J].国际检验医学杂质,2014,(000):021.[2]王静.不规则抗