荧光显微镜的基本原理及应用.pptx
上传人:骑着****猪猪 上传时间:2024-09-14 格式:PPTX 页数:20 大小:3.1MB 金币:20 举报 版权申诉
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会计学/一、荧光显微镜(fluorescencemicroscope)原理:某些物质经一定波长的光(如紫外光)照射后,物质中的分子被激活,吸收能量后跃迁至激发态;当其从激发态返回到基态时,所吸收的能量除部分转化为热量或用于光化学反应外,其余较大部分则以光能形式辐射出来,由于能量没能全以光的形式辐射出来,故所辐射出的光的波长比激发光的要长,这种波长长于激发光的可见光部就是荧光(fluorescence)。所谓荧光就是某些物质在一定波长光(如紫外光)的照射下、在极短时间内所发出的比照射光波长更长的可见光。//二、荧光显微镜的组成1、光源:一般采用高压汞灯2、滤色系统:由激发滤板和压制滤板组成a、激发滤板:提供一定范围的激发光b、压制滤板:完全阻挡激发光通过,提供相应滤长范围荧光3、反光镜:一般采用平面反光镜4、聚光镜:用石英玻璃或其他透紫外光的玻璃制成5、物镜和目镜Theopticalsystemofafluorescencemicroscope.Afiltersetconsistsoftwobarrierfilters(1and3)andadichroicmirror(beam-splitting2)三、荧光显微镜的操作四、荧光显微镜标本制作要求五、荧光染料的使用六、荧光组化实验中应注意的几个问题七、荧光显微镜应用技术八、使用注意事项1暗室内进行,打开汞灯5-10min稳定后再观察。2荧光淬灭(光漂白):激发光长时间照射会发生荧光减弱或消失,操作时注意及时用挡板阻挡激发光照射标本。3汞灯关闭后需冷却30min后再重新启动(最好不要短时间内反复开关,标本应集中观察。)4载物台前方黄色遮光板:最好不直接用肉眼看激发光,以防短波光中的紫外伤害。5标本染色后立即观察,因时间久了荧光会逐渐减弱。Theend,thankyou!