生物选修三复习先问问自己，这些都掌握了没有？11、限制性核酸内切酶的来源？12、限制性核酸内切酶的功能是什么？13、限制性核酸内切酶切割产生的DNA片断末端有哪两种形式？14、DNA连接酶的作用是什么？15、E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶的功能有什么不同？16、DNA连接酶和DNA聚合酶有什么区别？17、具备什么条件才能充当“分子运输车”？18、基因工程中使用的载体有哪几种？19、获取目的基因有哪几种方法？20、PCR技术的原理是什么？21、PCR技术中基因增加的方式是什么？22、PCR技术的步骤包括哪几步？23、基因表达载体包括哪些必需部分？24、启动子的作用是什么？通常启动子来自哪里？25、终止子的作用是什么？26、将目的基因导入植物细胞有哪几种方法？27、将目的基因导入动物细胞的常用方法是？28、动物基因工程的受体细胞通常是？29、原核生物具有什么特点？30、大肠杆菌最常用的转化方法是什么？概念：基因工程概念1、基因工程又叫做_______或__________。基因工程的别名来源：原核生物作用特点：特异性，即识别特定核苷酸序列（反向对称重复排列），切割特定切点（磷酸二酯键）。结果：产生黏性未端（EcoRI）（碱基互补配对）或平末端（SmaI）。①具有1至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入②在受体细胞中能复制并稳定保存③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择小结（一）目的基因的提取聚合酶链式反应（PCR）利用PCR技术扩增目的基因模板原料引物酶控制温度用化学方法直接人工合成文库类型（二）基因表达载体构建（1）用一定的_________切割质粒，使其出现一个切口，露出____________。（2）用_______________切断目的基因，使其产生____________。转化:目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。将目的基因导入微生物细胞⑴分子水平检测：①检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因：方法——DNA分子杂交(探针与基因组DNA)②检测目的基因是否转录出了mRNA：方法——分子杂交（探针与生物体mRNA）③检测目的基因是否翻译成蛋白质：方法——抗原—抗体杂交(生物中蛋白质与抗体)转基因生物四、基因工程的应用3、基因诊断:用放射性同位素(如32P)、荧光分子等标记的DNA分子做探针，利用DNA分子杂交原理，鉴定被检测标本上的遗传信息，达到检测疾病的目的。蛋白质工程比较：基因工程和蛋白质工程基因工程步骤(2009福建卷)转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点。请回答：（10福建卷）32．[生物—现代生物科技专题](10分)红细胞生成素(EPO)是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病由于天然EP0来源极为有限，目前临床使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生成素(rhEPO）期间要生产流程如右图（1）图中①所指的是技术。（2）图中②所指的物质是，③所指的物质是。（3）培养重组CHO细胞时，为便于清除代谢产物，防止细胞严物积累对细胞自身造成危害，应定期更换。（4）检测rhEPO外活性需用抗rhEPO单克隆抗体。分泌单克隆抗体的细胞，可由rhEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成（10天津卷）Ⅰ.（14分）下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性金银，BamHI、HindIII、SmaI直线所示为三种限制酶的酶切位点。据图回答：（1）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含的培养基上进行。（2）能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是（填字母代号）。A.启动子B.tetRC.复制原点D.ampR（3）过程①可采用的操作方法是（填字母代号）。A.农杆菌转化B.大肠杆菌转化C.显微注射D.细胞融合（4）过程②可采用的生物技术是。（5）对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。这利用了细胞的性。（6）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用（填字母代号）技术。A.核酸分子杂交B.基因序列分析C.抗原—抗体杂交D.PCR3、以重组DNA技术为核心的基因工程正在改变人类的生活，请回答有关问题：（1）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：第一步是目的基因的获取，获得目的基因的方法通常包括和；第二步是基因表达载体的构建，第三步是将目的基因导入受体细胞，第四步是。①通常在第一步和第二步的操作中需要相同的工具