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会计学1.储液瓶(输液管入口端安装有过滤器);2.高压(gāoyā)输液泵;3.混合器和阻尼器;4.进样器(阀);5.色谱柱;6.检测器;7.废液瓶;8.数据处理和控制系统HPLC仪器(yíqì)结构示意图首先高压泵将贮液器中流动(liúdòng)相溶剂经过进样器送入色谱柱,然后从控制器的出口流出。当注入欲分离的样品时,流经进样器贮液器的流动(liúdòng)相将样品同时带入色谱柱进行分离,然后依先后顺序进入检测器,记录仪将检测器送出的信号记录下来,由此得到液相色谱图。一、高压(gāoyā)输液系统1.溶剂贮存器溶剂贮存器一般由玻璃(bōlí)、不锈钢或氟塑料制成,容量为1到2L,用来贮存足够数量、符合要求的流动相。2.高压输液泵高压输液泵是高效液相色谱仪中关键部件之一,其功能(gōngnéng)是将溶剂贮存器中的流动相以高压形式连续不断地送入液路系统,使样品在色谱柱中完成分离过程。高压输液泵,按其性质(xìngzhì)可分为恒压泵和恒流泵两大类。恒压泵是保持输出压力恒定,而流量随外界阻力变化(biànhuà)而变化(biànhuà),如果系统阻力不发生变化(biànhuà),恒压泵就能提供恒定的流量。3.梯度(tīdù)洗脱装置梯度洗脱(xǐtuō)装置分类二、进样系统(xìtǒng)通常使用耐高压(gāoyā)的六通阀进样装置,其结构如图所示:三、分离(fēnlí)系统柱管材料:耐腐蚀耐压内径:2.0、3.0、4.1、4.6mm长度:5、10、15、25cm等固定(gùdìng)相:颗粒细、圆、均一、刚性强/一般在分离前备有一个前置柱,前置柱内填充物和分离柱完全(wánquán)一样,这样可使淋洗溶剂由于经过前置柱为其中的固定相饱和,使它在流过分离柱时不再洗脱其中固定相,保证分离技的性能不受影响。柱子装填得好坏对柱效影响很大。对于细粒度的填料(<20μm)一般采用匀浆填充法装柱,先将填料调成匀浆,然后在高压泵作用下,快速将其压入装有洗脱液的色谱柱内,经冲洗后,即可备用。柱温一般为室温或接近室温。四、检测(jiǎncè)系统在液相色谱中,有两种类型的检测器:一类是溶质(róngzhì)性检测器,它仅对被分离组分的物理或物理化学特性有响应。属于此类检测器的有紫外、荧光、电化学检测器等;一类是总体检测器,它对试样和洗脱液总的物理和化学性质响应。属于此类检测器有示差折光检测器等。㈠紫外光度检测器⒈作用原理依据被分析试样组分对待定波长紫外光的选择吸收性,组分浓度与吸光率的关系遵守(zūnshǒu)比尔定律。⒉工作(gōngzuò)过程⒊特点(tèdiǎn)㈡荧光(yíngguāng)检测器优点:是一种选择性强、灵敏度高,比紫外检测器高23个数量级,可达pg量级或更低,可用于梯度(tīdù)淋洗。缺点:样品适用范围有限,定量分析的线性范围较窄(104-105)。㈢示差折光(zhéguāng)检测器㈣电导(diàndǎo)检测器