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高效液相色谱仪(hplc)的操作经验(对外版)本人从事药品质检工作经验一段时间,将自己对仪器操作的一些感悟写出来,力求让那些初学者能够轻松掌握。因为本人刚开始也是很茫然的,看着一大堆文字资料无从下手,所以也能体会做为一个新手遇到的困难。现在这个操作流程与以往教科书中繁琐的讲解不同,力求以最简洁的语言让出学者学到东西,从一个新手开始出发学习hplc的操作。好的那么我们就以这台岛津lc-20at为例,给大家讲讲具体的操作流程。一台完整的色谱分析仪应包含:进样系统(泵),输液系统,分离系统,检测系统,数据处理系统。先介绍下这台色谱仪的主要部件:上部为检测器spd-20a,通常为紫外检测器,下部为泵,为排气,冲洗色谱柱之用途;右面的环状物是进样器(六通阀),将溶液注入其中;再右边的柱状成为注温箱,控制温度的作用(15~25C。)注温箱的内部便是心脏部分—色谱柱,用于分离各组分。此图为数据处理系统。需要在计算机上安装lcsolution软件,便可进行积分等操作,对峰进行处理,控制整个流程。以此计算含量,相关物制等。介绍完基本部件,那么我们开始讲讲操作的流程。1配置流动相。通常用甲醇和水80:20,75:25,或者乙腈配址流动相(不同物质流动相不同)。抽滤,超声使溶解。2开启计算机,泵,和检测器。用大针管冲洗进样口,待走一段基线后,准备进样。3流动相配置好后,将滤器换入该流动相中,盖好塞子,开泵,冲洗。4冲洗完毕后,点击[单词运行]打开方法文件,先进一针空白。然后用流动相润洗几次,进样。(样品溶液取1mg至10ml容量瓶,超声),进样量应为进样环体积5倍。数据保存在相应文件夹下。5等待峰走完后,开始积分。出去空白的峰不积分之外,其他都需积分。打印报告,可以看到峰面积,含量等数据。6清洗。同样用大针管注入纯水。半小时后可关机。注意保存数据。以备查验。