毛泡桐叶中乌索酸的提取分离及反相高效液相色谱分析【摘要】目的提取鉴定毛泡桐叶中的乌索酸，并建立其含量测定方法。方法采用“醇提凝析法”新工艺分离制备乌索酸，IR，MS，NMR鉴定其结构。建立反相高效液相色谱测定其含量的方法，色谱柱为KromasilC18柱，流动相为乙腈-甲醇-水-磷酸，流速ml/min，检测波长210nm，柱温25℃。结果乌索酸在～μg范围内线性关系良好。样品乌索酸含量为%，得率为%。结论“醇提凝析法”分离制备乌索酸工艺先进，实用可行，为工业试验生产乌索酸提供了技术条件；RP-HPLC法测定乌索酸含量准确、精密度高、重复性好、线性范围宽，可作为控制乌索酸质量的方法。【关键词】毛泡桐叶乌索酸结构表征反相高效液相色谱Abstract：Objective：ToextractandidentifyursolicacidfromPaulowniatomentosa(Thunb.)Steudleavesandtoestablishadeterminationmethodofursolicacid.Methods：UrsolicacidwasextractedfromPaulowniatomentosa(Thunb.)Steudleavesbyadoptinganewmethodofethanolextractionandagglutinationseparation,anditsstructurewasidentifiedbyIR,MSandNMR.AdeterminationmethodofursolicacidinPaulowniatomentosa(Thunb.)Steudleavesbyreversed-phasehighperformanceliquidchromtographwasestablished.Thechromatographiccolumn(KromasilC18,mm×250mm,5μm),acetonitrile-methanol-water-phosphoricacidmobilephase(168:682:150:,V/V)withml/minflowrate,thedetectedwavelength(210nm)andthecolumntemperature(25℃)wereadopted.Results：Ursolicacidshowedgoodlinearrelationshipintherangeof～μg(r=6).Theaveragerecoveryratewas%(RSDwas%).Thecontentwas%andthegainratewas‰.Conclusion：Themethodofethanolextractionandagglutinationseparationtoextractursolicacidisadvanced,rational,practicalandfeasible,anditprovidestechnologyconditionforindustrialproductionofursolicacid.RP-HPLCissimpleandaccurate,ithasgoodrepeatabilityandwiderlinearrange,anditcanbeusedtoevaluatethequalityofursolicacid.Keywords：Paulowniatomentosa(Thunb.)Steudleaf;Ursolicacid;Structuralcharacteristics;RP-HPLC毛泡桐叶为玄参科泡桐属植物毛泡桐Paulowniatomentosa(Thunb.)Steud的叶子［1］。泡桐的药用价值我国古代就有记载，《本草纲目》记有“桐叶主恶蚀疮着阴皮主五痔、杀三虫，花主傅猪疮，消肿、生发。”泡桐的花、叶、果、木、皮、根均可入药［2］。泡桐叶含桃叶珊瑚苷、泡桐苷、毛蕊花苷、异毛蕊花苷、糖苷、多酚类［2］及熊果酸、乙酰熊果酸α,β［3］等，其中三萜酸类，特别是乌索酸和齐墩果酸，具有抗菌、抗肝炎、抗肿瘤、降血糖血脂、增强免疫功能等多种药理作用，已引起人们广泛的关注［5，6］。为此，我们以毛泡桐叶为原料，采用“醇提凝析法”提取分离乌索酸［5，6］，并建立RP-HPLC测定分析乌索酸含量的方法，为开发利用丰富的毛泡桐药用植物资源提供科学依据。1器材与方法1材料毛泡桐叶采自江西宜春市宜春学院北校区，经江西省天然药物活性成分研究重点实验室鉴定为紫花毛泡桐(Thunb)Steud的叶子。95%乙醇；“YCXY-1号”除杂剂；复合酶制剂；活性炭；甲醇；水为超纯水；乌索酸对照品。2仪器Waters系列高效液相色谱仪；Perkin-El