高效液相色谱分析法一、液相色谱仪器highperformanceliquidchromatograph液相色谱仪（1）highperformanceliquidchromatograph液相色谱仪（2）液相色谱仪（3）液相色谱仪（4）二.概论：㈠定义：㈡.色谱法分类按固定相性质及外形分类（三）HPLC的主要分离类型和原理：2.液-液分配色谱（liquid-liquidpartitionchromatography）（1）传质快，表面无深凹陷，比一般液体固定相传质快；（2）寿命长，化学键合，无固定液流失，耐流动相冲击；耐水、耐光、耐有机溶剂，稳定；（3）选择性好，可键合不同官能团，提高选择性；（4）有利于梯度洗脱；正相色谱法与反相色谱法比较表3.离子交换色谱（ion-exchangechromatography）4.体积排阻色谱（size-exclusionchromatography）分离类型选择choiceofseparationtypes基本概念和术语：三.高效液相色谱法的特点featureofHPLC四.HPLC的系统组成和工作原理：（二）工作原理五.流程及主要部件processandmainassemblyofHPLC2.主要部件泵的使用和维护注意事项(2)梯度淋洗装置梯度洗脱装置是通过两个输液泵流速的变化，改变流动相的洗脱能力，其作用与气相色谱的程序升温类似。(3)进样装置六通阀使用和维护注意事项：(4)高效分离柱柱的使用和维护注意事项(5)液相色谱检测器a.紫外-可见光检测器b.光电二极管阵列检测器2024/9/20光电二极管阵列检测器c.示差折光检测器（differentialrefractiveindexdetector）示差折光检测器d.荧光检测器（fluorescencedetector）六.固定相和流动相⒉全多孔型固定相2.流动相类别3.流动相选择七.最常用的色谱定性定量分析方法㈡定量方法：2.内标法：⑵内标法特点3.外标法：操作条件变化对结果准确性影响较大。对进样量的准确性控制要求较高，适用于大批量试样的快速分析。HPLC在各领域的主要应用八.HPLC的应用谢谢大家