生物技术平时作业简答题（每题25分，共100分）1、基因工程中，把外源基因（目的基因）分离出来的方法主要有哪些？答：1直接从基因文库中获取（鸟枪法-用限制酶处理DNA，再根据所需选择目的基因）2、间接获取方法（人工合成）包括：反转录法和化学合成法2、基因工程常用的工具酶和载体有哪些？答：限制性核酸内切酶，用来切割目的基因和载体，主要是2型酶；DNA连接酶，用来连接目的基因和载体，有两类，连接平末端的和粘性末端的，若末端不相同连不起来的话，还得用DNA聚合酶来加片段，如加CCC-和GGG-，再用连接平末端的连接酶来连接.基因工程的载体：质粒，噬菌体和动植物病毒等1、质粒载体pBR3222、克隆载体3、表达质粒载体真核细胞常见表达载体必须要具备强启动子有终止子核酸内切酶位点筛选标志序列（如抗药性基因片段）有复制子3、简述单克隆抗体产生的技术原理。答：1975年，KÖhler和Milstein首创了B淋巴细胞杂交瘤细胞和单克隆抗体技术。其基本原理是：使小鼠免疫脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，形成杂交瘤细胞，每一个杂交瘤是用一个B细胞融合而产生的克隆。这种细胞既保持了骨髓瘤细胞大量无限增殖的特性，又继承了免疫B细胞合成分泌特异性抗体的能力。将这种融合成功的杂交瘤细胞株体外扩增或接种于小鼠腹腔内，则可从上清液或腹水中获得单克隆抗体。用这种方法制备的抗体具有结构高度均一，特异性强，无交叉反应等特点。通过细胞融合技术将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，所产生的融合细胞既具有亲本骨髓瘤细胞的无限繁殖的生物学特性，又具有另一亲本B淋巴细胞合成、分泌特异性抗体的能力。应用此技术从一个抗体分泌性B细胞杂交瘤分裂增殖，形成一个大的细胞克隆。由B细胞杂交瘤细胞克隆产生的只识别抗原分子上某一个抗原决定簇的纯抗体，即单克隆抗体。单克隆抗体具有纯度高、特异性强、利于实验标准化即可大量生产供应等特点。4、什么是发酵工程，发酵的基本原理是什么？答：发酵工程：是指采用现代生物工程技术手段，并通过现代化学工程技术，利用生物的某些特定功能，生产有用物质或直接用于工业生产的过程。发酵原理的核心内容是微生物复杂系统运行的自然规律（即微生物生命活动的三个基本假说）。代谢能支撑假说（生命活动的前提，动力）暗示：微生物活细胞是耗散结构，这种结构依靠代谢能来支撑。这个假说体现了生命活动的空间性（方位排列的有序）、时间性（周期变化的有序）。代谢网络假说（生命活动的内容，结构）显示：代谢网络是细胞代谢活动的运行图。这个假说体现了生命活动的整体性、流动性、层次性。HYPERLINK"http://baike.baidu.com/view/1296277.htm"\t"_blank"细胞经济假说（生命活动的法则，控制）揭示细胞经济的运行原理，它们体现了细胞代谢活动的自主性。