第一节测定生长繁殖的方法第一节测定生长繁殖的方法1、直接法：用血球计数板在显微镜下进行计数第二节微生物的生长规律一、微生物的个体生长和同步生长Ⅰ延滞期(lagphase)影响延滞期长短的因素Ⅱ指数期(exponentialphase)三个重要参数G=(t2-t1)/n=(t2-t1)/3.322(lgX2-lgX1)影响代时长短的因素Ⅲ稳定期(stationaryphase)③通过对稳定期到来原因的研究，促进了连续培养原理的提出和工艺、技术的创建；IV衰亡期(deathphase)三、微生物的连续培养方法是一种根据培养器内微生物的生长密度，并借光电控制系统来控制培养液流速，使细菌培养液保持恒定的连续培养方法；主要用于获得大量菌体或与菌体相平行的代谢产物。2、恒化器(chemostat)恒浊与恒化培养控制装置装置分批培养与连续培养的比较连续培养的优缺点微生物的高密度培养第三节影响微生物生长的主要因素一、温度(temperature)嗜冷菌(<20oC)嗜温菌(20-45oC)嗜热菌(50-60oC)嗜高温菌(80-95oC)极端高温菌(105-150oC)ThermophileandBiotechnology二、氧气(oxygen)微生物与氧的关系厌氧菌的氧毒害机制去除·O2-等有害活性氧分子的机制三、pH值第四节微生物培养方法概论1、好氧菌的实验室培养2、厌氧菌的实验室培养Hungate滚管厌氧罐技术厌氧手套箱第五节有害微生物的控制1、灭菌(sterilization)2、消毒(disinfection)3、防腐(antisepsis)4、化学治疗(chemotherapy)比较项目（一）物理方法——高温杀菌烘箱内热空气灭菌法1、热蒸汽对细胞成分的破坏作用更强；2、热蒸汽比热空气穿透力更强；3、蒸汽存在潜热，当气体转变成液体时可放出大量热量；4、可迅速提高灭菌物体的温度。比较项目巴氏消毒法间歇灭菌法(fractionalsterilization)高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌锅构造1、加水至止水线；2、灭菌物品包裹好；3、开启放气阀；4、加热排气；5、达到预定表压，开始计时；6、关闭热源，当压力降至0.05MPa时，缓慢开启放气阀。4、过滤过滤除菌（二）化学方法杀菌类型影响消毒剂作用的因素是指那些能够特异性地作用于某些微生物并具有选择性毒性的化学药剂；根据来源分为两类：人工合成(主要是一些生长因子类似物)磺胺类药物；微生物产生抗生素（1）磺胺类药物—生长因子类似物对氨基苯甲酸（PABA）(正常代谢物）二氢叶酸二氢叶酸（2）抗生素(antibiotics)抗生素的抗菌谱抗生素的作用机制1.抑制细胞壁合成微生物的抗药性筛选新的抗生素；对天然抗生素的结构进行改造；寻找比抗生素疗效更为广泛的生理活性产物；生物药物素：具有多种生理活性的微生物次生代谢物；酶抑制剂免疫调节剂受体拮抗剂抗氧化剂在微生物的培养过程中，如果要缩短其生长的延迟期，可以在菌种、培养基和其它方面采取哪些措施?细菌生长曲线分哪几个时期？各时期有何特征及在工业发酵中的应用。单细胞微生物的群体生长规律常分为哪四个时期？各有何特点？辨析题：分批培养时，细菌首先经历一个适应期，此期间细胞处于代谢活动的低潮，所以细胞数目并不增加。在微生物培养过程中，引起pH改变的原因有哪些？在实践中如何保证微生物处于较稳定和合适的pH环境中？根据下图中五类对氧关系不同的微生物在半固体琼脂柱中的生长状态，分别写出它们的名称思考题推导在细胞的指数增长阶段细胞的传代时间G可由下式计算：G=t·lg2/(lgXt-lgX0)；t为时间，Xt为t时刻的细胞数，X0为初始细胞数。好氧微生物液体培养主要有哪些形式？它们各自有哪些用途和特点？消毒和灭菌的概念有何不同？实验室常用消毒和灭菌的方法有那些？分别指出灭菌原理、优缺点、涉及仪器的简述操作步骤及注意事项。请比较青霉素和溶菌酶在制备细菌原生质体中的作用原理。