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1开机预热1.1先打开电脑主机和显示器,在打开仪器的电源开关,打开桌面的UVProbe2.33,出现下图对话框,仪器进入初始化状态。1.2仪器初始化大概需要5min,进行一系列的机械的检查和初置,当所有项目检查完后,单击“OK”按钮,仪器可进行下步操作。2光谱模块测定2.1首先选择测定的方式,在主菜单中的所示的各键中,选择(光谱)2.2参数的设置,点击菜单栏中的键,出现下图:对话框中的“波长”范围根据所测样品的要求设定,“扫描速度”一般选择中速。“采样间隔”与“扫描速度”根据实验需要设置。参数设置完后点击“确定”按钮。然后在“光谱方法”对话框中点击“仪器参数”标签,在“测定方式”目录中选择吸收值。设定完参数后,点击“确定”,将参数传给仪器。2.3先将装有空白液比色皿放入样品池扣除空白吸光度,然后将装有样品比色皿放入样品池进行检测。软件自动测定样品的吸光度,并自动绘制曲线图。2.4储存,测量完毕后,单击工具栏中的“保存”按钮储存到指定位置。2.5关机,将比色皿从样品池中取出,先关闭软件UVProbe2.33,再关闭仪器电源开关。3光度测定模块3.1仪器初始化后,首先选择测定的方式,在主菜单中的“光谱、光度测定、动力学”模块中,选择“光度测定”模块。3.2单击光度计键条中的(baseline基线),启动基线校正操作。3.3当基线参数对话框(baselineParameters)弹出时:在开始波长和结束波长中分别输入实验所需的波长范围内进行基线校正,点击“OK”按钮。3.4待扫描结束后,点击输出窗口InstrumentHistory(仪器履历)标签。查看列出的基线校正信息。注意在基线校正过程中光度计状态窗口的读数变化,读数变化≤3nm可接受。当完成基线校正后,可进行以下操作。3.5参数的设置点击菜单栏中的键,出现下图:在wavelength(波长类型)中可供选择point(单点)和range(范围),point表示测定单点波长;range表示测定波长范围。例如选择Point,在Wavelength(nm)(波长)中输入538,则ColumnName出现WL538.0,点击add(添加)加入,点下一步,出现下图(photometricMethodWizard……):在Type(MultiPoint,SinglePoint,K-Factor,Rawdate)中选择MultiPoint,在Formula(Fixedwavelength,Ratio,Different)中选择FixedWavelength,WL1选择上一步添加过的波长,例如WL538.0为上面添加过的。Untis为单位设定,可添加自己需要波长的单位。Parameters中采用默认设置。单击下一步;出现下图(标准表):一般选择默认状态,其中Sample选择表示重复测定的次数;Promptbeforerepetition表示在重复测定之前进行提示。再单击下一步;出现下图(样品表):和上面类似,用默认设置即可。再单击下一步,出现下图(PhotometricmetricWizard-[FileProperties]):在Filename中,有默认的文件路径和文件名,也可以自己命名,命名规则:先注名日期,后写上做样人的姓氏,再缀上样品编号。例如,水明于2006年5月29做编号问2006-5-281的样品,则文件名为:60529shui281,并储存在指定的文件夹下,单击完成。3.6标准表设定在Standtable栏中单击右键,出现一个菜单,选择Properties,出现下图(StandardTableProperties):设定SampleIDName和StepValue,选择了AutoFill后,就可进行自动填充。同理进行样品表的设置。3.7标准曲线绘制在样品室逐个放入标准,点击键即可。软件自动测定各标准溶液的吸光度,并自动绘制标准曲线。所配标准溶液的吸光度在0.15~1.0范围内,吸收测定的精密度约为0.5%(注:摩尔吸收系数为10l/mol.cm、光程为1cm的石英皿,浓度为1*10-5~1.5*10-6mol/l范围时,即可得到0.15~1.0范围的吸光度)。标准测定完毕,工作曲线自动显示。接下去测定未知样品的吸光度。3.8储存测量完毕后,单击工具栏中的(保存),储存到上图(PhotometricmetricWizard-[FileProperties])指定的位置。3.9关机将比色皿从样品池中取出,先关闭软件UVProbe2.33,再关闭仪器电源开关。4仪器维护和保养4.1分光光度计的室温应保持在15℃~35℃,相对湿度应控制在45%~80%,防尘、防爆、防电磁,仪器周围不应有强磁场