实验题目：小鼠腹腔注射筒箭毒碱ED50的测定DeterminationofCl-Tubocurarine'sMedianEffectiveDose（ED50）【实验目的】了解ED50的测定方法、原理、计算过程与意义。【相关理论】1．关于量反应，质反应：量反应是指个体上反应的强度并以数量的分级来表示；例如：血压、尿量等。质反应是指群体中所观察到的某一效应的出现；如：生死、有效或无效。以阳性反应的出现频率或百分数来表示（全或无，阳性率）。2．关于ED50，LD50，以及治疗指数:能使群体中有半数个体出现某一效应的剂量，称为半数效应量，若此效应为有效，则为半数有效量ED50，ED50是质反应的参数。若此效应为死亡时，则为半数致死量LD50。治疗指数=LD50/ED50=TI，该值越大越好，说明药物越安全.可用机率单位正规法或点斜法求出LD1，ED99；LD5，ED95。3．肌松药分为去极化型和非去极化型两种。去极化型肌松药的代表为琥珀酰胆碱，其肌松作用不能被抗胆碱酯酶药新斯的明拮抗，反而会加重。非去极化型肌松药的代表为筒箭毒碱，其肌松作用能被新斯的明解救。4．测定ED50，LD50的意义可计算治疗指数TI（LD50/ED50），为临床安全用药提供指导。【实验动物】小鼠（昆明种KM），雌雄各半。【实验器材】铁丝网，铁架台，天平，注射器等。【实验方法】应用点斜法测定ED50。应用该方法测定ED50时，实验设计必须符合以下5点要求：1）动物以5~8组为宜；2）每组动物数须一致；3）各组给药剂量应呈现等比数列；4）各组给药剂量的公比r=1.1~1.6；5）最大剂量（Dmax）组的阳性反应率须≥80%，最小剂量（Dmin）组的阳性反应率须≤20%【实验方法】1．预实验：目的是为了找出符合上述点斜法要求5）的Dmax和Dmin。阳性反应判定标准：20min内小鼠落下3次（注意排除因互相拥挤而落下所造成的假阳性）。2．确定组数（n）后，根据Dmax和Dmin，计算各组应给予的剂量，Dmax=rn·Dmin。注意公比r应在上述要求的范围内，即=1.1~1.6。分别计算出各组应注射的剂量，见下表：Group123456…No.Dmax=DoseDminr·Dmin2·Dminr3·Dminr4·Dminr5·Dmin…GroupNo.123456...DoseDminr·Dminr2·Dminr3·Dminr4·DminDmax=r5·Dmin…3．正式实验：a．筛选小鼠：将小鼠放在铁丝网上，观察10分钟，不掉下来为合格，可以参与实验。此步的目的在于排除假阳性；b．称重、标记；c．给药观察：腹腔注射ip筒箭毒碱。每组分别给予相应的剂量。d．计算阳性率：阳性反应标准：给药后20分钟内自铁丝网上掉下来3次者为阳性。【计算】小鼠ip筒箭毒碱的ED50是多少？其95%可信区间是多少？1）lgED50=Xm-i（∑P-0.5）其中，Xm=lgDmax，i=lgr，∑P：阳性率之和因此，ED50=lg-1[Xm-i（∑P-0.5）]2）ED50的95%可信区间=lg-1[lgED50±1.96Sx50]，其中，Sx50为ED50的标准误：Sx50=i(∑P-∑P2)1/2/(n-1)，n为各组动物数。【作图】对阳性率-对数剂量作图。【思考题】质反应的量效曲线与量反应的量效曲线有何不同？答案：如以药物的效应为纵坐标，药物的剂量或浓度为横坐标作图，则得到直方双曲线；如将药物浓度或剂量改用对数值作图，则呈典型的S形曲线，这就是通常所说的量效曲线(图-1)。定量阐明药物的剂量(浓度)与效应之间的关系，有助于了解药物作用的性质，为临床用药提供参考。药理效应是连续增减的量变，可用具体数量或最大反应的百分数表示的，称为量反应，如血压、心率、血糖浓度等，其研究对象为单一的生物单位。如果药理效应表现为反应性质的变化，而不是随着药物剂量或浓度的增减呈连续性量的变化，则称为质反应，其反应只能用全或无、阳性或阴性表示，如存活与死亡、惊厥与不惊厥等，其研究对象为一个群体。如果用累加阳性率与对数剂量(或浓度)作图，也呈典型的对称S形量效曲线(图-2)。附：1、记录表格示例1（每组用）WeightofVolumeofTime:Time:endofTimesofNo.+/-body(g)injectioninjectionobservationfalling(ml)down1234567