实验1附子炮制前后致小白鼠中毒表现得影响(6学时)【目得】观察生附子与制附子致小白鼠得死亡数量,评价炮制对附子毒性得作用。【器材】1ml注射器、鼠笼、天平。【药品】生附子水煎醇沉液(上清液)0、5g/ml、制附子水煎醇沉液(上清液)0、5g/ml。【动物】小鼠,雌雄各半,体重18～22g。【方法】小鼠20只,雌雄各半,随机分为2组。按0、2ml/10g腹腔注射给药,第1组给予生附子水煎醇沉液,第2组给予制附子水煎醇沉液。观察并记录30min内各组小鼠死亡情况。【结果】记录生附子水煎醇沉液组与制附子水煎醇沉液组动物死亡数,比较两者毒性得大小。【注意事项】生附子与制附子水煎液制备时均应煎煮4小时以上。【思考题】根据实验结果讨论炮制前后附子毒性作用差异得原因。实验2生大黄、制大黄以及大黄、芒硝配伍对小白鼠小肠运动得影响(炭末法)(4学时)[目得]了解生大黄、制大黄对肠蠕动得影响以及大黄与芒硝配伍得药理意义。[原理]利用黑色炭末作为指示剂,观察炭末在肠道得推进距离。口服生大黄可刺激肠蠕动加速,有泻下作用,故对胃肠实热有“釜底抽薪”之功。大黄久煎或炮制之后,致泻成份分解,作用减弱,而芒硝在肠内不易被吸收,使肠内渗透压升高,大量水分保留在肠腔,机械性刺激肠壁而致泻。故生大黄与芒硝配伍有“增水行舟,润燥软坚”之功效,致泻作用增强。[器材]手术剪、眼科镊、直尺、注射器、灌胃针头、天平,烧杯,搪瓷盘或蛙板。[药品]炭末生理盐水混悬液0、1g/m(炭末为活性炭),生大黄水煎液1g/ml(含炭末0、1g/m1),制大黄水煎液1g/ml(含炭末0、1g/ml,生大黄水煎液加芒硝(生大黄1g/ml+芒硝0、5g/ml+炭末0、1g/m1),苦味酸。[动物]小白鼠。[方法]取禁食20~24h成年、体重相近得12只小白鼠,随机分为4组,每组3只,用苦味酸标记。分别用上述4种炭末液0、3ml/10g体重灌胃。给药30min后脱颈椎处死,打开腹腔分离肠系膜,剪取上端至幽门,下端至回盲部得肠管,置于托盘上。轻轻将小肠拉成直线,测量肠管长度作为“小肠总长度”。从幽门至炭末前沿得距离作为“炭末在肠内推进距离”。取各组3只小自鼠平均值,用公式汁算炭末推进百分率,并注意观察各组小肠容积就是否增大。炭末在肠内推进距离(cm)炭末推进率=×100%小肠全长(cm)[结果]按结果记录分析并填表。生大黄、制大黄及大黄加芒硝对小白鼠肠蠕动得影响组别动物数(只)剂量(g/kg)小肠总长度(cm)炭末推进距离(cm)炭末推进l率(%)肠容积变化生理盐水生大黄制大黄生大黄加芒硝[注意](1)开始给药至处死动物得时间必须准确,以免时间不同造成实验误差。(2)实验动物体重越接近越好,平均体重最好用23~25g小鼠,肠管比较粗大,易于操作。(3)肠容积变化可以上下端接扎,称取重量,以定量化。[附](1)生大黄制剂得制备:取生大黄100g,砸成小块后,以水浸没。冷浸24h后.过滤,40℃水浴浓缩至1g/ml。(2)制大黄制剂得制备:取制大黄l00g,加水煎沸1、5h以上,过滤,药液水浴浓缩至1g/ml。[思考题](1)大黄致泻得主要成分及作用机理就是什么？(2)大黄加芒硝为何致泻作用增强？有哪些主要方剂有大黄与芒硝配伍使用？实验3天麻对小白鼠得镇静作用(活动计数法)(2学时)【目得】通过天麻注射液对小鼠自发活动得影响,了解其镇静作用。【原理】天麻可使小鼠自发活动明显减少,从而认为平肝息风药功效得发挥似与它们得镇静作用有关。【器材】注射器、天平。【药品】天麻注射液0、12g/ml、生理盐水、苦味酸溶液。【动物】小白鼠。【方法】取活动度近似得小鼠,按体重随机分为2组,用苦味酸标记。分别腹腔注射天麻注射液0、2ml/10g及等容量生理盐水。给药30min后将各组小鼠分别放人自主活动箱中,连续观察到20min比较给药组与对照组小鼠活动数,用公式计算各给药组小鼠20min累计自发活动抑制率:对照组小鼠自发活动数－给药组小鼠自发活动数自发活动抑制率＝×100％对照组小鼠自发活动数【结果】实验结果按表记录。天麻对小白鼠得镇静作用(活动计数法)组别给药途径剂量给药后20min活动数自发活动抑制率(g/kg)(％)生理盐水组天麻注射液组【注意事项】(1)在测小鼠自发活动时注意保持实验环境得安静及实验条件得一致,否则对实验结果得影响很大。(2)第一只小鼠测完自发活动后,把自发活动箱檫拭干净、尽量去除气味后再放入第二只小鼠,以减少小鼠之间得相互干扰。实验4人参、灵芝对小白鼠游泳时间得影响(4学时)[目得]观察人参、灵芝对小鼠游泳时间得影响,掌握抗疲劳作用药物得常用筛选方法。[原理]人参、、灵芝能促进人体对糖原与三磷酸腺苷等能量物