新冠肺炎核酸检测采样操作规范与技术分享随着新冠肺炎疫情常态化，疫情防控措施的不断更新，现依据《新型冠状病毒肺炎防控方案（第八版）》要求，采集的临床标本包括上呼吸道标本（如鼻咽拭子、咽拭子等）、下呼吸道标本（如深咳痰液、肺泡灌洗液、支气管灌洗液、呼吸道吸取物等）、粪便/肛拭子标本、尿液、抗凝血和血清标本等。尽管下呼吸道样本检测阳性率更高一些，但实际被采集对象大多是没有痰液可以咳出的，更不可能去冒风险开展费时费力的肺泡灌洗等操作。因此，上呼吸道样本采集便成了是首选。一、新冠肺炎核酸采集具体标本种类有以下八个分类：1.上呼吸道标本：包括鼻咽拭子、口咽拭子等。2.下呼吸道标本：深咳痰液、肺泡灌洗液、支气管灌洗液、呼吸道吸取物等。3.便标本/肛拭子：留取粪便标本约10克（花生大小），如果不便于留取便标本，可采集肛拭子。4.血液标本：尽量釆集发病后7天内的急性期抗凝血，采集量5ml，建议使用含有EDTA抗凝剂的真空釆血管采集血液。5.血清标本：尽量釆集急性期、恢复期双份血清。血清标本主要用于抗体的测定，不进行核酸检测。6.尿标本：留取中段晨尿，采集量2～3ml。7.物体表面标本：包括进口冷链食品或进口货物的内外包装表面，以及运输储藏工具等可能被污染的部位进行涂抹采集的标本。8.污水标本：根据海运口岸大型进口冷冻物品加工处理场所排水系统分布情况，重点选取污水排水口、内部管网汇集处、污水流向的下游或与市政管网的连接处等2-3处点位进行采样。二、根据县疾病预防控制中心具体新冠病毒样本采集情况来看，主要与上呼吸道标本的鼻咽拭子、口咽拭子和物体表面标本以及污水标本为主。在这几个标本采集过程中经常会遇到的问题有以下几点：1.鼻咽拭子：鼻咽拭子采样时，①容易出现的错误有两处。一个是角度问题，一个是误把鼻甲肿胀当成鼻咽部。②采样时被采者头部不断后退，不能进行采集。2.咽拭子：采集咽拭子时经常看不到咽后壁，主要原因是舌头会挡住视线。其原因有以下几点：①被采者没有适合采样姿势或过于紧张等不能很好的张开嘴巴，导致采样人员看不到咽后壁。②采样时被采者头部不断后退，拭子根本没有达到咽后壁。③采样环境光线差，不利于采集标本的同时也增加了医务人员暴露机会。④隔着栏杆采样，不便于观察，更不利于控制患者头部。3.物体表面标本出现错误标本采集方法是：①直接用咽拭子擦拭物体表面。②标本采集面积过少。③标本采集频次不够。4.污水标本出现错误标本采集方法是：①污水采集分类不清，直接将污水倒入标本病毒保存液内。②污水采集布点不够。③污水采集频次不够。三、采样操作规范以及在不同标本采集中遇到的问题相对应的解决建议。1.鼻咽拭子采样操作规范：采样人员一手轻扶被采集人员的头部，一手执拭子贴鼻孔进入，沿下鼻道的底部向后缓缓深入，由于鼻道呈弧形，不可用力过猛，以免发生外伤出血。待拭子顶端到达鼻咽腔后壁时，轻轻旋转一周（如遇反射性咳嗽，应停留片刻），然后缓缓取出拭子，将拭子头浸入含2～3ml病毒保存液的管中。除认真执行操作规范外建议：①让被采集者将头尽量后仰，同时采样时把握进杆深度。如果进杆仅4-5cm甚至更短，说明角度不对或者碰到鼻甲了。建议换另一鼻孔。到达咽后壁时会有抵触感。成人鼻口至鼻咽部约8cm。除认真执行操作规范外建议：被采集者采取坐位采样，让其坐在座椅上，头部尽量后仰时能靠紧墙壁或是靠在座位靠椅上，也可用手托住被采集者头部，使头部得到固定，避免头部后退。注：尽量避免使用手托住被采集者头部，因在实际操作中，出现有人质疑与采样人员接触会不会导致感染。2.咽拭子采样操作规范：被采集人员先用生理盐水漱口，采样人员将拭子放入无菌生理盐水中湿润（禁止将拭子放入病毒保存液中，避免抗生素引起过敏），被采集人员头部微仰，嘴张大，并发“啊”音，露出两侧扁桃体，将拭子越过舌根，在被采集者两侧扁桃体稍微用力来回擦拭至少3次，然后再在咽后壁上下擦拭至少3次，将拭子头浸入含2～3ml病毒保存液（也可使用等渗盐溶液、组织培养液或磷酸盐缓冲液）的管中，尾部弃去，旋紧管盖。咽拭子也可与鼻咽拭子放置于同一管中。除认真执行操作规范外建议：①采集前向被采集者做好解释工作，避免紧张情绪，尽量找条件给被采集者坐在座椅上，头部后仰时能靠墙壁或是靠在座位靠椅上，头部就能得到固定。当没有座椅时，让被采者处于半蹲位或蹲位，以免被采者用站姿采集，以免高于采样人员，导致看不到咽后壁。②采样环境光线差，不利于采集标本的同时也增加了医务人员暴露机会。尽量在采样环境光线充足的地方进行采样。③隔着栏杆采样，不便于观察，更不利于控制患者头