1.一元、二元载体构建(ɡòujiàn)的原理及适用范围？2.DNA四个碱基是怎么(zěnme)组合的？2.1核酸(hésuān)的组成碱基种类(zhǒnglèi)和结构DNA与RNA核苷(ribonucleoside)的形成(xíngchéng)核苷酸(ribonucleotide)的结构(jiégòu)核酸(hésuān)的结构核酸(hésuān)的一级结构核酸(hésuān)的二级结构B-DNA双螺旋结构(jiégòu)模型要点（Watson,Crick,1953）B-DNA双螺旋结构(jiégòu)模型要点（Watson,Crick,1953）增强子捕获：报告基因与最小启动子融合，典型的最小启动子，含TATAbox及转录起始位点，但不能单独驱动报告基因的表达，若被插入位点附近的增强元件(yuánjiàn)激活，则可导致报告基因的表达。启动子捕获：用不带启动子的报告基因(jīyīn)，随机插入染色体中，由插入位点附近基因(jīyīn)的启动子启动报告基因(jīyīn)表达，通过检测报告基因(jīyīn)是否表达、以及报告基因(jīyīn)在生物体中的表达部位，可以判断报告基因(jīyīn)插入位置附近是否有基因(jīyīn)的启动子存在以及该基因的表达是否有特异性。基因捕获：载体的报告基因之前含一个或多个剪切受体序列，报告基因前也无启动子，只有插在一个转录单位之内且方向正确时才能(cáinéng)表达。突变体库数量(shùliàng)的计算方法？水稻耐淹与深水稻基因(jīyīn)的克隆和遗传分析一、研究背景(bèijǐng)与意义二、相关基因(jīyīn)的克隆与功能分析1.Sub1A（Submergence1）1.1定位群体的构建与基因(jīyīn)克隆1.2Sub1位点的基因(jīyīn)结构和相关基因(jīyīn)淹没的诱导表达在淹没十天和恢复三天的过程中对两个亲本(qīnběn)基因转录本进行半定量RT-PCR分析1.3Sub1A-1在转基因水稻中淹没诱导(yòudǎo)下的表达情况Northernblotanalysis，淹没恢复(huīfù)10天后检测1.4通过分子辅助(fǔzhù)选择将Sub1A-1导入到不耐淹的水稻品种中通过QTL和Mapping克隆了水稻耐淹基因Sub1A-1，位于9号染色体；该基因编码一类ERF蛋白，在淹没诱导下表达，基因功能缺失突变体在淹水情况下通过调节SLR1、SLRL1的表达进而抑制植株生长；是一类逆境适应基因，对水稻功能基因组学研究(yánjiū)与分子育种意义重大。2.SNORKEL1与SNORKEL2分布——主要在东南亚、孟加拉国、印度等国，中国暂时没大面积有种植深水稻的报道；生存条件——深水稻一般生长在1~6m深的水中，通常不会超过8m，最浅的约为50cm，深水稻的茎可长达5~6m，主要条件取决于水位、光照(guāngzhào)和土壤三大因素；特征特性——具有强烈的光敏感，在一定的水深和光照(guāngzhào)条件下开花，种子容易脱落，种子在光照(guāngzhào)和水深适宜的条件下发芽，其休眠期可长达数周；产量——平均产量为300~400斤/亩左右。C9285一个典型的深水稻品种；在T65与C9285杂交的后代(hòudài)检测到3个QTL，分别位于1、3与12号染色体，其中位于12号染色体的效应最大；发展一个以T65为背景的带有C9285的12号染色片段的近等基因系，以此克隆到了SNORKEL1与SNORKEL2。2.3SNORKEL1、SNORKEL2的克隆(kèlónɡ)及表达d.SK1、SK2的基因结构(jiégòu)；e.AP2/ERF；f.SK1、SK2基因的表达；g.SK1、SK2器官的特异表达；h.SK基因的过表达实验。2.4SNORKEL1、SNORKEL2的分子(fēnzǐ)特性c.植物激素对SK基因表达的影响；d.凝胶迁移滞后实验；e.乙烯在深水稻中促进节间伸长(shēnchánɡ)（非深水条件）；f.有乙烯抑制剂的时节间的伸长(shēnchánɡ)；g.深水条件下乙烯含量的测定。2.4赤霉素对深水反应(fǎnyìng)的效应与分子机制2.5SK基因(jīyīn)的分布及其QTL加性效应水稻(shuǐdào)育种中的QTL加性效应通过QTL、Positionalcloning和获得功能分析克隆到了适应深水环境(huánjìng)（避淹）基因SNORKEL1与SNORKEL2，位于12号染色体；乙烯信号因子，该基因主要在茎杆和叶片中表达，突变体在淹水情况下诱导表达，通过抑制ABA的合成增加GA的量而促进植株的伸长生长；为水稻适应逆境生理机制提供新的理论依据，对水稻功能基因组学研究和分子育种意义巨大。水稻中乙烯(yǐ