鸡白细胞介素18成熟蛋白的表达、纯化及其单克隆抗体的制备与特性鉴定的综述报告鸡白细胞介素18（IL-18）是一种重要的炎症介质和免疫调节因子，可通过促进细胞凋亡、调节T细胞的活性和分化、增强自然杀伤细胞和单核细胞的活性等途径对免疫系统发挥着重要的调节作用。因此，研究IL-18的表达、纯化和特性是目前生命科学领域的热点研究之一。本文将对鸡白细胞介素18成熟蛋白的表达、纯化及其单克隆抗体的制备与特性鉴定做综述报道。一、鸡IL-18的表达及纯化鸡IL-18的基因序列已在公共数据库中报道，因此可以通过基因工程技术将其表达为重组蛋白。目前，鸡IL-18主要通过E.coli表达系统进行表达和纯化。首先，将鸡IL-18的编码序列克隆至表达载体中，然后转化至E.coli菌株中进行表达。细胞培养达到一定程度后，可通过破细胞、离心、层析等一系列步骤进行纯化，得到目标重组蛋白。另外，还可以通过真核细胞系统进行表达，例如鸡卵巢细胞系或哺乳动物细胞系等，但目前这种方法的应用比较有限。二、鸡IL-18的单克隆抗体制备制备鸡IL-18的单克隆抗体通常需要选择合适的免疫原和合适的免疫动物。常用的免疫原包括纯化的重组鸡IL-18蛋白或表达鸡IL-18的真核细胞系。选择免疫动物时，通常选择小鸡或兔子等，免疫方案一般需要多次免疫，包括初免、二免、制备和筛选等多个步骤。最后，通过蛋白免疫吸附或免疫亲和层析等方法制备单克隆抗体。具体步骤如下：1.确定最佳免疫原和免疫动物，制备抗原。2.经典免疫方法进行初免和二免。3.根据结果筛选克隆，并进行下一步免疫（冲击免疫或分泌免疫等）。4.根据实验结果用ELISA或Westernblot等方法对克隆抗体进行筛选。5.针对正品鸡IL-18蛋白进行抗原竞争实验和交叉反应实验，确定制备的单克隆抗体的特异性和亚型。6.质检和评价制备的单克隆抗体。三、鸡IL-18单克隆抗体的特性鉴定单克隆抗体制备成功后，需要进行特性鉴定。主要包括以下几个方面：1.抗体特异性的鉴定。通过Westernblot、ELISA、免疫组化等方法进行抗体的特异性鉴定，确定抗体对鸡IL-18的特异性。同时，该抗体是否与其他鸡分泌因子或细胞表面分子发生特异性结合也应该进行鉴定。2.抗体亚型的鉴定。根据兔多克隆抗体抗原结合区的氨基酸序列，通过免疫组化或间接ELISA等方法确定抗体的亚型。3.抗体的亲和力测定。用ELISA、分子亲和层析等方法测定抗体对鸡IL-18的亲和力，确定其敏感性和特异性。4.抗体的交叉反应性测定。用免疫化学方法或Westernblot等方法检测抗体是否与其他物种的IL-18发生交叉反应，以及其大小是否与正品鸡IL-18的分子量相符。总之，鸡IL-18的表达、纯化和单克隆抗体的制备和特性鉴定是对鸡IL-18进行深入研究的关键步骤。建立鸡IL-18的表达、纯化和单克隆抗体制备方法，为进一步明确其调节机制和生物学功能提供了重要的技术支持。