BAFF及其受体融合蛋白的构建表达纯化与功能鉴定的中期报告本研究旨在构建、表达纯化并进行功能鉴定BAFF及其受体融合蛋白。截至目前，已完成如下工作：1.已成功构建BAFF及其受体（BAFF-R、TACI和BCMA）的融合蛋白表达质粒。将融合蛋白的序列设计并合成后，克隆到pET28a(+)载体中，得到BAFF-Fc/pET28a(+),BAFF-R-Fc/pET28a(+),TACI-Fc/pET28a(+)和BCMA-Fc/pET28a(+)构建表达质粒。2.进行了大肠杆菌BL21(DE3)的转型和表达。将构建好的表达质粒转化进BL21(DE3)细胞中进行表达，同时控制感受态发酵过程中的菌体生长和表达质粒的转录表达。3.进行了脱附柱层析纯化。收集到大肠杆菌经过超声、破细胞后的上清液，以蛋白A树脂为毛细管柱，对表达的融合蛋白进行纯化。4.已经对表达纯化的BAFF-Fc/pET28a(+)、BAFF-R-Fc/pET28a(+)、TACI-Fc/pET28a(+)和BCMA-Fc/pET28a(+)进行了Westernblot检测。结果表明，检测出的蛋白质大约在70kDa左右，符合预期的分子量。5.接下来的工作计划是进一步对纯化蛋白的功能进行鉴定。首先，将蛋白质进行定量，然后进行ELISA等生物学实验，利用分子生物学、生化学、免疫学等多方面的手段，探究融合蛋白的生物学功能。