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会计学【目的(mùdì)要求】【基本原理】【动物、器材(qìcái)与试剂】【方法(fāngfǎ)与步骤】1、仪器(yíqì)准备2、离体蛙心的制备(zhìbèi)(斯氏蛙心插管法)左手提起(tíqǐ)左主动脉上方的结扎线,右手用眼科剪在结扎线下方、沿向心方向将动脉管壁剪一斜口(注意要剪破血管内膜,每次心缩时有血自切口涌出,但不要把血管剪断,剪口位置视套管尖端长度与心脏大小而定)。选择大小适宜的斯氏蛙心套管,盛入少量任氏液(内加一滴肝素溶液,套管内2-3cm高度)。左手用眼科镊提起(tíqǐ)切口缘,右手将注有任氏液的斯氏套管插入动脉干内,然后左手持左侧血管分支上的结扎线向外拉,右手将蛙心套管送入动脉圆锥。当套管尖端到达动脉圆锥基部时,应将套管稍向后退(因主动脉内有螺旋瓣会阻碍插管前进),并将套管尾端稍向右主动脉方向及腹侧面倾斜(qīngxié),使插管尖端向动脉圆锥的背部后下方及心尖方向推进,在心室收缩时经主动脉瓣进入心室。稳定住套管后,轻轻提起备用线,将左、右主动脉连同插入的套管用双结扎(jiézā)紧(不得翻液),再将结线固定在套管的小玻璃钩上,然后剪断结扎(jiézā)线上方的血管。看清静脉窦的位置,在心脏的下方绕一线,将左右肺静脉及前后腔静脉一起结扎(jiézā)(注意切勿损坏静脉窦)。轻轻提起套管和心脏,于静脉窦下方剪断有牵连的组织,仅保留静脉窦与心脏的联系,使心脏离体。其他方法(fāngfǎ)技巧3、连接(liánjiē)实验装置4、实验(shíyàn)观察3)向套管内加2-6滴5%NaCl溶液,作好加药标记,观察心搏曲线的频率及振幅变化。当曲线出现明显变化时,应立即吸去套管中的灌流(ɡuànliú)液,并做好冲洗标记,迅速用新鲜任氏液清洗2-3次,待心搏恢复正常。4)向套管内加1-2滴2%CaCl2溶液,作好加药记号,观察心搏曲线的频率及振幅变化。标记、冲洗至心搏恢复正常5)向套管内加入1-2滴1%KCl溶液,记录心搏曲线的变化。当心搏曲线变化时,同法更换灌流(ɡuànliú)液,待心搏恢复正常。【注意事项】6、标本制备好后,若心脏功能状态不好(不搏动),可向插管内滴加1~2滴2%CaCl2或1:10000肾上腺素,以促进(起动)心脏搏动。在实验程序安排上也可考虑促进和抑制心脏搏动的药物交换使用。7、给药后若效果不明显,可再适量滴加,并密切注意药物剂量添加后的实验结果。给药量必须适度,加药出现变化后,就应立即更换任氏液,否则会造成不可挽回的后果,尤其是K+稍有过量(guò〃liàng),即可导致难以恢复的心脏停跳。8、谨防灌流液沿丝线流入张力传感器内而损坏其电子元件。实验(shíyàn)结果/CaCl2灌流(ɡuànliú)KCl灌流(ɡuànliú)1:10000E灌流(ɡuànliú)1:10000Ach灌流(ɡuànliú)【思考题】实验(shíyàn)拓展