第38卷第3期西南民族大学学报·自然科学版May.2012JournalofSouthwestUniversityforNationalitiesNaturalScienceEdition___________________________________________________________________文章编号:1003-2843(2012)03-0383-04沼泽红假单胞菌培养基配方及培养条件优化实验研究全亚玲,戴静,马力,郝葆青（西南民族大学生命科学与技术学院,成都610041）摘要:目的:确定沼泽红假单胞菌培养的最优化培养基成分组合和培养条件,为沼泽红假单胞菌直接作为光合叶面肥应用提供试验数据.方法:采用单因素试验设计分别对沼泽红假单胞菌培养的接种量、pH值、温度、光照强度四种因4素的不同水平进行比较试验,确定其各自最佳试验水平；采用L9(3)正交试验设计从9种培养基成分组合中选择出最优化试验配方组合.结果:沼泽红假单胞菌生长最优条件为:接种量为15%、pH值为7.2、温度为35℃、光照强度为2000xl时；最佳培养基组成配方为:NH4Cl1.0g、K2HPO40.5g、NaHCO33.0g、酵母膏2.0g.结论:优化的生长条件和培养基配方组成能有效促进沼泽红假单胞菌生长和繁殖.关键词:沼泽红假单胞菌;培养条件;培养基优化;单因素试验;正交试验设计中图分类号:S182文献标识码：Adoi：10.3969/j.issn.1003-2483.2012.03.12光合细菌简称PSB,是地球上最古老的菌种之一,广泛存在于自然界的土壤、水田、沼泽、湖泊、江海等处,具有原始光能合成体系,能以光作为能源,在厌氧光照或好氧黑暗条件下利用自然界中的有机物、硫化物、氨等作为供氢体兼碳源进行光合作用[1-3].按照《伯杰细菌鉴定手册》(1974年第8版)[4]分类,光合细菌分为45种,沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonaspalustris)属于光合细菌分类中的红螺菌科、红假单胞菌属.沼泽红假单胞菌菌体富含各种生物活性蛋白、泛酸、叶酸和B族等多种维生素,并且活性菌株含有某些抗病抗逆性物质,在经济植物种植上已得到较为广泛应用[5-7].据报道,将该菌直接作为叶面肥使用,既能促进植物的生长发育和体内酶的合成,增强光合作用,加速植物对养分的吸收和转化,有利于提高作物的产量和品质；同时又能够改善土壤菌群的分布,提高土壤的肥力[8-9].但是,沼泽红假单胞菌培养基成分的配搭以及各种培养条件的研究仍然是制约该菌广泛应用的主要因素之一[10].本文采用单因素试验设计分别对沼泽红假单胞菌培养的菌接种量、pH值、4温度、光照强度进行了最佳试验水平的检测,并且采用L9(3)正交试验设计对培养基成分配搭进行了优化试验；最终确定该类菌株的最优生长条件和培养基配方组成.1材料与方法1.1实验材料1.1.1菌种沼泽红假单胞菌（本实验室所保存）1.1.2基础培养基NH4Cl、K2HPO4、NaHCO3、酵母膏、蒸馏水1.1.3主要仪器___________________________收稿日期：2012-03-30通讯作者：郝葆青(1956-),男,教授,博士,E-mail:baoqhao@gmail.com.资助项目：西南民族大学研究生“创新型科研项目”.384西南民族大学学报·自然科学版第38卷___________________________________________________________________超净工作台(苏净集团安泰公司)、PGX-270B多段可编程光照培养箱(宁波东南仪器有限公司)、电热恒温鼓风干燥箱(上海精宏实验设备有限公司)、紫外可见分光光度计(上海龙尼柯仪器有限公司)、高压灭菌锅(TOMY,Nerima-ku,Tokyo,Japan)、电子天平、酸度计1.2实验方法1.2.1沼泽红假单胞菌种的制备将实验室保存的菌株在无杂菌的条件下转接3次,于30℃、2000lx光照条件下培养48h.1.2.2沼泽红假单胞菌培养条件的优化实验单因素实验设计,选用四个因素即沼泽红假单胞菌接种量(5%、10%、15%、20%、25%)、pH值(6.0、6.5、7.0、7.5、8.0)、温度(15℃、20℃、25℃、30℃、35℃、40℃)、光照强度(1500lx、2000lx、2500lx、3000lx、3500lx、4000lx).分别测试出每个培养条件因素中最佳水平的指标.4表1培养基L9(3)正交试验因素水平表因素A因素B因素C因素D水平NH4Cl(g/L)K2HPO4