细胞工程PPT课件.pptx
上传人:王子****青蛙 上传时间:2024-09-13 格式:PPTX 页数:126 大小:2.8MB 金币:10 举报 版权申诉
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主要(zhǔyào)内容:细胞工程:细胞工程的分类(fēnlèi):第一节细胞工程的基础知识与基本(jīběn)技术原核细胞真核细胞二、基本(jīběn)实验操作技术(二)细胞培养技术(jìshù)(三)细胞融合技术(jìshù)第二节植物(zhíwù)细胞工程20世纪初,德国植物学家Haberlandt就曾预言“植物细胞具全能性”。但由于技术上的限制,离体培养细胞未能分裂。不久之后,Hanning成功地培育出能正常发育的萝卜和辣根菜的胚,成为植物组织培养的鼻祖。20世纪30年代(niándài),植物组织培养取得了长足的进展。我国植物生理学创始人之一李继侗、罗宗洛和罗士伟相继发现银杏胚乳和幼嫩桑叶的提取液能分别促进离体银杏胚和玉米根的生长,据此证明维生素和其他有机物是培养基中不可缺少的重要组成成分。1934年美国(měiɡuó)人White以西红柿根为材料,建立了第一个能无限生长的植物组织组培物。1956年Miller发现了激动素,并指出激动素能强有力地诱导组织培养中的愈伤组织分化出幼芽。这是植物组织培养中的一项重要进展。1958年Steward顺利地从胡萝卜的细胞培养中分化长出了胚状体乃至整株。从此以后,通过组织培养方法培育完整植株的探索便在世界范围内蓬勃开展。现在已有600多种植物能够借助组织培养的手段进行快速繁殖,多种具有重要经济价值的粮食作物、蔬菜、花卉、果树、药用植物等实现了大规模的工业化、商品化生产。我国的植物组织培养工作起步较迟,但已经在多个方面取得了巨大成绩。植物(zhíwù)细胞工程1、定义(dìngyì):已分化的植物(zhíwù)细胞可以发育成一个植物(zhíwù)体二、植物(zhíwù)组织培养离体的植物器官、组织或细胞(1)选择(xuǎnzé)合适的外植体(2)灭菌(mièjūn)植物组织培养的培养基定义:含有一定营养成分,供培养植物生长的基质(jīzhì)包括:①矿质元素(大量元素和微量元素)②碳源:蔗糖③琼脂:凝固剂④植物激素:生长素,细胞分裂素⑤维生素和有机添加物条件:适宜的温度、PH、无菌切取离体的植物器官、组织或细胞2、诱导去分化(fēnhuà)阶段愈伤组织:离体的植物器官、组织或细胞(xìbāo),在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞(xìbāo)(细胞(xìbāo)排列疏松而无规则、高度液泡化、无定形)。离体的植物器官、组织或细胞3、继代(jìdài)增殖阶段离体的植物器官、组织或细胞4、生根(shēnggēn)发芽阶段试管(shìguǎn)苗离体的植物器官、组织或细胞5、移栽(yízāi)成活阶段移栽2、植物(zhíwù)组织培养细胞培养图片(túpiàn)细胞培养图片(túpiàn)培养(péiyǎng)室三、植物体细胞(xìbāo)杂交1、定义(dìngyì):(一)原生质体的制备(zhìbèi)植物A细胞(三)杂合体(hétǐ)的鉴别与筛选1、杂合细胞的显微镜鉴别2、互补法筛选杂合细胞3、采用(cǎiyòng)细胞与分子生物学的方法鉴别杂合体4、根据融合处理后再生长出的植株的形态特征进行鉴别二、植物(zhíwù)细胞培养和次生代谢物的生产案例(ànlì)紫杉醇存在于红豆杉属植物的树皮、叶及茎中,其中树皮中的含量最高,大约从12000株成年紫杉树中才能(cáinéng)提取1KG的紫杉醇,而且紫杉的生长周期很长,在世界分布很少。紫杉醇的国际市场价格为450美元/g日本有关组织从红豆杉中诱导产生愈伤组织,筛选得到细胞培养4周就增殖了5倍,紫杉醇的含量达到了0.05%,比树皮中紫杉醇的含量高达10倍。Ketchum从6种紫杉醇属植物中进行愈伤组织的诱导,获得了产生紫杉醇的高产细胞株,在悬浮培养下,细胞内的紫杉醇含量超过了20mg/L。清华大学化工系生物化工(shēnɡwùhuàɡōnɡ)研究所通过固液两步培养法可以在4周内获得20g/L干物质,利用代谢调控技术在2~3天内将紫杉醇的含量提高到0.063%左右。2、利用植物细胞培养生产天然色素(sèsù)典型案例——紫草宁紫草宁可用作创伤、烧伤以及痔疮的治疗药物,同时又因为其漂亮的紫红色而作为高级色素使用。紫草宁产生于亚洲的多年生植物紫草的根部。但紫草资源(zīyuán)严重不足,在日本,紫草已濒临灭绝,在我国,紫草(Arnebiaeuchroma)列入了国际二级保护植物紫草的人工栽培成活率低,而且(érqiě)直接提取紫草宁的无法满足市场需求。化学合成紫草宁的工艺非常复杂,且最终产率只有0.7%,生产成本昂贵。紫草宁在国际市场上售价高达7000美元/kg五、人工种子(zhǒngzi)的研制(一)人工种子的构成(gòuchéng)及特点2、人工种子(zhǒngz