课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 (2).pptx
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课题2:土壤中分解尿素的细菌的分离与计数尿素是一种重要的农业氮肥,分子式为H2NCONH2,不能直接被农作物吸收。土壤中的细菌将尿素分解成氨之后才能被植物利用。一、研究思路你能想一想怎样能将分解尿素的细菌从土壤中分离出来吗?(一)筛选菌株实例:TaqDNA聚合酶的发现2、选择培养基选择培养基配方1、显微镜直接计数:2、稀释涂布平板法(活菌计数法)样品稀释培养示意图每克样品中的菌落数=(C÷V)×MC代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(ml),M代表稀释倍数。是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。实例:在做分解尿素的细菌的筛选与统计菌落数目的实验时,A同学从对应的106倍稀释的培养基中筛选出大约150个菌落,但是其他同学在同样的稀释度下只选择出大约50个菌落。分析其原因。小结:通过这个事例可以看出,实验结果要有说服力,对照的设置是必不可少的。二实验设计实验具体操作步骤:制备选择培养基(尿素为唯一氮源)制备牛肉膏蛋白胨培养基3、样品的稀释按浓度捆成一摞观察不同形态的菌落不同形态的菌落(一)培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是否筛选出菌落对照的培养皿在培养过程中没有菌落生长,说明培养基没有被杂菌污染。牛肉膏培养基的菌落数目明显大于选择培养基的数目,说明选择培养基已筛选出一些菌落。(二)样品的稀释操作是否成功如果得到了2个或2个以上菌落数目在30~300的平板,则说明稀释操作比较成功,并能够进行菌落的计数。(三)重复组的结果是否一致如果学生选取的是同一种土样,统计的结果应该接近。如果结果相差太远,教师需要引导学生一起分析产生差异的原因。研究思路