右旋糖苷修饰酵母蔗糖酶的研究的中期报告本实验旨在研究右旋糖苷修饰对酵母蔗糖酶的影响。在前期实验中，我们利用PCR技术扩增了酵母蔗糖酶基因，并将其克隆到表达载体pET-28a中。接着我们将其大量表达并纯化蛋白，最终得到了较为纯净的酵母蔗糖酶。在本期实验中，我们将进行右旋糖苷修饰的实验，首先我们需要合成α-D-glucosyl-β-D-glucoside（Glc-β-Glc）底物。我们将以D-glucose1-phosphate和Glc-α-1-O-naphthyl菜单糖为原料，通过酶催化反应合成Glc-β-Glc底物，该底物将被用于右旋糖苷修饰酵母蔗糖酶的反应中。实验中我们将利用右旋糖苷转移酶（α-glucosidaseYicI）将Glc-β-Glc转移至酵母蔗糖酶的特定位点上，从而构建右旋糖苷修饰的酵母蔗糖酶。该酵母蔗糖酶具有较强的稳定性和催化活性，同时也具有均匀的右旋糖苷基团修饰。在实验过程中，我们将首先对右旋糖苷转移酶进行大量表达和纯化。接着，我们将采用一系列方法，如质谱分析、光谱分析和酶活性测定等方法，对修饰后的酵母蔗糖酶进行鉴定和分析，并与未修饰的酵母蔗糖酶进行对比研究。预计通过本实验可以揭示右旋糖苷修饰对酵母蔗糖酶的影响，为进一步研究酵母蔗糖酶的功能和应用提供重要的实验基础。