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会计学实验目的:实验原理:质壁分离法测定细胞的渗透势:当细胞发生初始质壁分离(组织中部分细胞在角偶处发生质壁分离时)并与外界溶液达到水分平衡时,细胞的压力势为0,此时细胞的水势等于细胞的渗透势等于外界溶液的渗透势。外界溶液的渗透势由ψs=-iCRT计算出;其中i:解离系数;C:溶液的摩尔浓度;R:气体常数0.0821;T:绝对温度273±t实验方法:实验材料:实验操作程序:小液流法测定植物细胞水势:小试管(第一组)和第二组(青霉素小瓶)蔗糖梯度溶液用于测定植物叶片的水势。1)用打孔器从植物叶片上钻取(或剪成)大小相同的小块,每一青霉素小瓶中放数片圆片(5片),塞好塞子,放置30分钟,在这段时间内摇数次,务使叶片浸入溶液中。2)到时间后依次取出叶圆,向每一小瓶中各加少许甲烯蓝,溶解后,把已着色的溶液装入毛细管(方法是用拇、中指持毛细管,插入有色溶液中,待溶液柱已达3~4mm时,用食指紧按住毛细管的上端,慢慢取出毛细管)。将毛细管壁上黏附的溶液用干净滤纸擦去。然后将毛细管浸入第一组相应浓度的蔗糖溶液中,使毛细管的尖端位于溶液的中部,然后自毛细管中心缓慢地放出少量蓝色溶液,并观察放出的小液流移动的方向,并记录。3)记录小液流不动的那个试管的蔗糖溶液浓度。为精确求出材料水势,可依据该结果配制浓度差更小的一梯度溶液,按上述方法再做第二次(或更多次)。4)按ψs(solution)=ψwcell(Pa)(ψs(solution)=ψwcell=-iCTR)计算水势。ψs表示渗透势,单位(Pa),1巴=1X105PaR:表示气体常数:0.083X105L.Pa/mol.K;T:表示绝对温度,即273℃±t(实验时温度);I:表示等渗系数,蔗糖等于1;C:表示等渗溶液的克分子浓度质壁分离法测定细胞渗透势:1)从带有花青素的洋葱鳞茎撕取外表皮,从高浓度开始,每隔一定的时间(5分钟)依次向浓度递减的蔗糖溶液(第三组)中迅速浸入4~5片表皮,使其完全浸入,25分钟后(时间不能太长,容易造成原生质体伤害和出现质壁分离复原现象),从0.6M开始依次取出表皮放在滴有同样浓度溶液的载玻片上,盖上盖玻片,在显微镜下观察各种溶液中表皮细胞的质壁分离的情况,如果在两个相邻浓度的蔗糖溶液中,一个开始有质壁分离的现象(半数细胞左右有),而另一个没有,我们就可以初步确定细胞的渗透势与这两个极限溶液浓度之平均值的渗透势相等。2)4)按ψs(solution)=ψscell(Pa)(ψs(solution)=ψscell=-iCTR)计算水势。ψs表示渗透势,单位(Pa),1巴=1X105Pa=0.1MPaR:表示气体常数:0.083X105L.Pa/mol.K;T:表示绝对温度,即273℃±t(实验时温度);I:表示等渗系数,蔗糖等于1;C:表示等渗溶液的克分子浓度//植物气孔形态、结构观察以及在不同植物叶片上的分布特点:用镊子小心取下牵牛花等植物叶片的上表皮或下表皮在显微镜下观察,记录气孔形态,气孔开启状况,分布情况(密度,上下表皮分布差异等)实验结果:2、记录所观察植物气孔形态、结构以及在不同植物叶片上的分布特点:思考题: