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会计学水势表示水分的化学势;水从水势高处流向低处;植物体细胞之间,组织之间以及植物和环境之间的水分移动方向由水势差决定(流速和方向)。植物组织水势(和渗透势)的测定方法:液相平衡法-小液流法、重量法;质壁分离法。所需仪器设备简单,但手续繁琐、效率低,难以自动记录。压力平衡法-压力室法。适于测定枝条或整个叶片的水势,对于小型样品叶圆片等则无能为力。气相平衡法-热电耦湿度计法、露点法。能广泛用于各种植物叶片水势和渗透势的测定,所需样品量极少、测量精度高,是近年来发展起来的一类较好的植物水势及其组分的测定技术。一、液体交换法测定植物组织水势(小液流法)组织失水,外液浓度变小;ψw植物>ψS3、根据外液浓度的变化情况即可确定与植物组织相同水势的溶液浓度。根据以下公式计算出溶液的渗透势,即为植物组织的水势。溶液渗透势的计算:ψS=﹣iCRT式中ψS—溶液的渗透势,以MPa为单位;R=0.008314MPa·L·mol﹣1·K﹣1T—绝对温度,即273+t℃;C—溶液的质量摩尔浓度,以mol·kg-1H2O为单位i-溶液的等渗系数,CaCl2可用。(二)实验材料大叶黄杨叶片(取叶片8-10个,随去随用,不要带枝条?)试剂:CaCl2溶液:,,,,,0.5mol·kg-1H2O甲烯蓝粉末取干燥洁净的试管12支,分成甲、乙两组。甲组试管中分别加~0.5六种浓度的溶液之一各(量准确?)。用一只移液器低高。乙组试管加入6种浓度的CaCl2溶液各4ml,用一只移液器低高。4ml需要很准确吗?4.甲、乙两组试管分别塞上相应的橡皮塞备用。为什么盖橡皮塞?5.选取均匀一致的植物叶片8~10片(勿水洗!),打取叶圆片60余片,甲组试管内各加入叶圆片10个,使叶片浸入溶液,盖上橡皮塞,平衡20min以上。期间多次摇动试管,以加速水分平衡。6.染色:在甲组每一试管中用解剖针放入微量甲烯蓝粉末,摇匀,溶液变蓝。(干燥针头先用蒸馏水湿润,加入的甲烯蓝量一定少)7.观察液滴升降:用毛细管取甲组试管有色液乙组试管中部液滴位置?观察液滴升降并记录。8.分别测定不同浓度中有色液滴的升降,找出与组织水分势相当的浓度,根据原理公式计算出组织的水势。/加样器的使用注意事项:1.所取材料在植株上的部位要一致,打取叶圆片要避开主脉和伤口。2.取材以及打取叶圆片的过程操作要迅速,以免失水。到实验材料生长处操作。3.甲烯蓝易吸附在试管壁上,先用水洗刷,再用铬酸洗液浸泡。,铬酸洗液回收,可以重复使用。二、露点法测定植物组织水势测量时,先给热电偶施加反向电流,使样品室内的热电偶结点降温,当结点温度降至露点温度以下时,将有少量液态水凝结在热电偶结点表面,此时切断反向电流;停止外加电流后,热电偶结点温度因热交换平衡而很快上升;但是,当到达露点温度时,因表面水分蒸发带走热量,降温,从而使其温度保持在露点温度,呈现短时间的稳衡状态。待结点表面水分蒸发完毕后,其温度将再次上升,直至恢复原来的温度平衡。记录露点时的稳衡状态的温度,便可将其换算成待测样品的水势或渗透势。HR-33T-R型露点微伏压计/露点微伏压计操作方法干旱叶片平衡时间延长打开主机电源(1)打开主机电源开关。将℃/μV开关置于“μV”位置。(2)将C-52探头连接到插口上。注意:在连接和拔出C52探头时FUNCTION开关处在“SHORT”位置上。严禁手握插头连线插拔探头(3)按下Πv按钮,调节ΠvSET旋钮使表头指针达到C52连接线上标注的Πv值。(4)将量程(RANGE)旋钮放在预期的位置上(通常在30位置),FUNCTION旋钮放在READ位置上,调节ZEROOFFSET旋钮使指针读数为零。(5)将FUNCTION旋钮调到COOL位置,此时表头的指针向右偏转,当指针移动到最大时,将FUNCTION旋钮调到DP位置,此时表头的指针向左偏转,当表头的指针稳定后,从表头上读取测定值。如果RANGE旋钮位于10或100的位置,按上排刻度读数如果RANGE旋钮位于30或300的位置,按下排刻度读数读数为电势差,电势差与水势的呈线性函数,比例系数为。样品水势(MPa)=读数μV/()测定结束,打开C-52顶部的旋钮,推出样品室清理植物组织仪器操作特别注意:1、拔下样品室插头时握住插头,严禁连线插拔,并且不要传动连线;2、样品一定放平,防止污染探头(热电偶)。1.样品水势不同,所需平衡时间不同,样品水势越低,所需平衡时间越长。如正常供水一般平衡时间20~30min;而严重平衡时间需2h以上。平衡时间过短,不能测出正确结果;平衡时间太长,也会造成实验误差。2.在使用C-52样品室时,切勿将样品放得高出或大于样品室小槽,否则推进后样品易接触探头热点偶