INTRACELLULARCOMPARTMENTANDPROTEINSSORTING第一节蛋白质分选的基本原理第二节膜泡运输第三节内质网第四节高尔基体第五节溶酶体与过氧化物酶体定义：结构、功能和发生上相关的内膜形成的细胞结构称为细胞内膜系统。功能：区隔化；增加表面积。系统发生上内膜起源于质膜的内陷和内共生。个体发生上内膜来源于原有内膜系统的分裂，具有epigenetic的特性。第一节蛋白质分选的基本原理一、蛋白质分选信号signalsequenceandsignalpatch二、蛋白质分选运输机制第二节胞内膜泡运输衣被小泡在细胞内沿微管或微丝运输。与膜泡运输有关的马达蛋白有3类，在这些马达蛋白的牵引下，可将膜泡运到特定的区域。动力蛋白（dynein），趋向微管负端；驱动蛋白（kinesin），趋向微管正端；肌球蛋白（myosin），趋向微丝的正极。一、衣被类型三种衣被小泡的功能（一）笼形蛋白衣被小泡ClathrincoatedvesiclesDeep-etchviewofatypicalclathrinlatticeSelectivetransportbyclathrincoatedvesicles当衣被小泡形成时，可溶性蛋白dynamin聚集成一圈围绕在芽的柄部，使柄部的膜尽可能地拉近（小于1.5nm），导致膜融合，pinchoff衣被小泡。（二）COPI衣被小泡COPIVesiclesCopIandIIVesiclesLys-Asp-Glu-Leu（KDEL）（三）COPⅡ衣被小泡COPIIVesiclesCOPIICoatedvesicle二、衣被形成ER上形成COPII小泡时，SAR1交换GDP/GTP而激活。激活的SAR1暴露出脂肪酸链尾巴，插入ER膜，促进衣被蛋白的核化和组装。SAR1可激活磷脂酶D，将一些磷脂水解，使衣被蛋白牢固地结合在膜上。当小泡从膜上释放后，衣被很快就解体。Coatassembly三、膜泡运输的定向机制SNAREsSNAREsinvesicletransport神经细胞中，SNAREs负责突触小泡的停泊和融合。破伤风毒素和肉毒素能选择性地降解SNAREs，阻断神经传导。病毒融合蛋白的工作原理与SNAREs相似，介导病毒与宿主质膜的融合。HIVfusionprotein（二）RabsRabsindocking四、受体介导的内吞衣被小窝（coatedpits）是质膜内凹的部位，相当于分子过滤器(约占肝细胞表面积2%)。受体、笼形蛋白和衔接蛋白大量集中于此处。受体胞质端的Tyr-X-X-Φ是衔接蛋白识别的信号，X为任何氨基酸，Φ为分子较大的疏水氨基酸(如Phe、Leu、Met)。受体同配体结合后启动内化作用，衣被开始组装。Clathrincoatedpitonthecytosolicfaceofacell低密脂蛋白的吸收：胆固醇主要在肝细胞中合成，以低密脂蛋白（low-densitylipoproteins，LDL）释放到血液。LDL颗粒芯部含有被长链脂肪酸酯化的胆固醇分子。周围由磷脂和胆固醇构成的脂单层包围，有一个较大的Apo-B蛋白（配体）。LDLParticleLDLendocytosis细胞需要胆固醇时，合成LDL跨膜受体蛋白。受体与LDL颗粒结合后，形成衣被小泡；进入细胞质的小泡随即脱掉衣被，成为平滑小泡，同早期内体融合，内体中PH值低，使受体与LDL颗粒分离；再经晚期内体将LDL送人溶酶体。在溶酶体中，LDL被水解成游离的胆固醇。Thereceptor-mediatedendocytosisofLDLLDLEndocytosis受体回收途径：①大部分返回原来的质膜结构域，如LDL受体；②有些进入溶酶体被消化，如EGF的受体，称为受体下行调节（receptordown-regulation）；③有些被运至质膜不同的结构域，形成穿胞运输（transcytosis）。Transcytosis五、外排作用Theconstitutiveandregulatedsecretorypathways第三节内质网一、形态与组成RERSER膜含60%的蛋白和40%的脂类，PC含量较高，SM含量较少，没有或很少含胆固醇。约30多种膜结合蛋白，另有30多种位于ER网腔。葡糖-6-磷酸酶是ER标志酶，核糖体结合糖蛋白（ribophorin）只分布在RER，P450酶系只分布在SER。二、ER的功能Blobel等（1975）提出信号假说，认为蛋白质N端的信号肽，指导蛋白质转至内质网上合成，获1999年诺贝尔生理医学奖。蛋白质转移到内质网合成涉及以下成分：信号肽：位于N端，约16~30个氨基酸，含有6-15个连续排列的带正电荷的非极性氨基酸，又称开始转移序列