项目二十七常用实验动物的接种和采血方法一、接种方法(一)皮下注射皮下组织疏松的部位都可皮下注射。一般小鼠在腹部两侧，豚鼠在腹部或大腿内侧，家兔取背部，大腿内侧或耳根部皮下注射。注射部位消毒后，左手提起皮肤，右手持注射器将针头水平刺入皮下，针头摆动无阻力，说明已进入皮下，慢慢注入，注射部位随即隆起。注射完毕，用棉球压住针刺处，再拔出针头。小鼠注入量一般为0.2～0.5ml。家兔或豚鼠注入量为0.5～1.0ml．(二)皮内注射先将动物注射部位的毛剪去，消毒，然后左手绷紧皮肢，针头斜面向上，紧贴皮肤表层刺入，然后向上挑起再稍刺入，缓慢注射。若注入皮内，注射部位马上有小泡隆起。皮内注射量一般为0.1～0.2ml。(三)肌内注射应选择肌肉发达、无大血管通过的部位。一般多选臀部、大腿内侧或外侧。针头直接刺入肌肉，回抽针栓如无回血即可注射。家兔等大动物注射量不超过2ml。(四)腹腔注射小白鼠腹腔注射时，用右手拉鼠尾，左手食指和拇指捏住脑背部皮肤，翻转鼠体，把鼠尾和一侧的后腿夹于小指和无名指之间，使动物处于头低位，使内脏移向上腹，右手持注射器在下腹部左侧或右侧刺入皮下，沿皮下朝头部方向进针0.5～1.0cm，再以45°角刺入腹腔，此时有落空感，回抽无肠液，尿液或血液即可缓缓注入。家兔等较大动物注射，应先固定，于腹部腹中线旁侧1cm处进针。小鼠注射量一般为0.5～1.0ml，家兔或豚鼠为5ml。(五)静脉注射1．家兔将家兔固定，用酒精棉球轻轻按摩耳翼，压迫耳根部静脉，使耳缘静脉扩张。用左手拇指与中、食指抓住耳尖部，从耳尖部边缘静脉平行进针，试推进少量注射液，如果觉得没有阻力，局部也没有隆起，表示已进入静脉，将注射液缓缓注入。若失败，再逐步向耳根部移位重新注射。注射完毕，用棉球压住针眼处，拔出针头。注射部位一般选用耳外缘静脉，易固定，表浅；耳内缘静脉深，不易固定，故不常用。2．小鼠于尾部两侧静脉注射。固定小鼠使尾巴露出，置45℃～50℃温水浸泡1～2min，使尾部静脉扩张。取出尾巴，擦干消毒，在末端1/3或1/4处用左手捏住尾巴，右手持注射器，针头与静脉平行缓慢进针，试注入少许注射液，如无阻力，皮肤不发白，表示针头刺入静脉，否则应更换部位重扎。注射时多选用41/2#针头。最大注射量为0.5ml。二、采血方法(一)小鼠采血方法1．断尾采血将小鼠固定，露出尾巴，用手轻揉或浸泡于45℃温水中数分钟或用酒精棉球涂擦，使尾血管充血。将鼠尾擦干，用剪刀剪去尾尖1～2mm。然后用手指从尾根部向尾尖捋，血即从断端流出。采血结束后消毒止血。此法采血每只小鼠可采十余次，每次可采血约0.1ml。2．眼眶后静脉丛采血左手抓注鼠耳间头部皮肤，将头按在桌面或鼠笼上，轻压颈部两侧，引起头部静脉血液回流困难，使眼球充分突出，眶后静脉丛充血。右手持长为7～10cm玻璃滴管(毛细管端内径1～1.5mm，长约1cm)或7#针头的1ml注射器，在内眼角与眼球之间轻轻向眼底方向刺入，刺入深度约2～3mm，当感到有阻力时停止，同时边旋转采血管边退出约0.1～0.5mm，以切开静脉丛，利于取血。稍加抽吸即可取出血液。当得到所需血量后，即除去颈部压力，同时将采血器拔出。可在数分钟后同一穿刺孔部位重复采血。每次可采血0.2～0.3ml。3．摘除眼球采血用左手将小鼠固定，压迫颈部，使眼球突出，将鼠倒置，用弯头小止血钳或镊子迅速摘除眼球(或挖取眼球)，并将眼球后包膜捅破，血液极快自眼眶流出或喷出，直至达到取血量。如取血时眼部血液凝固，可再摘除对侧眼球，并规律性挤压胸腔，以便更多血液流出。一般可取动物体重4%～5％的血液量。此种方法为一次性取血，取血后动物多死亡。(二)豚鼠采血方法1．心脏采血将豚鼠背位固定，胸腹部朝上，用左手触摸选择心脏跳动最明显处(一般在胸骨左侧4～6肋间)进针。如果刺入心脏，血液随心脏搏动进入注射器，迅速抽取血液。若抽不出血液，可把针慢慢进入或退出，直至血液抽出。如采血失败，应拔出针再操作，不许在胸腔内将针头左右摆动，以防划破心、肺引起死亡。每次采血量6～7ml，间隔2～3周后可再次采血。2．耳缘切口采血将耳消毒后，用刀片割破耳缘，血液即可自切口处流出。采血后用消毒纱布压迫止血5～15s。每次采血量约0.5ml。(三)家兔采血方法1．耳静脉采血剃去耳缘毛，用浸二甲苯的棉球擦试耳缘静脉使其扩张，然后涂以无菌凡士林以防血凝。用刀片尖沿血流方向切开血管3～5mm，用无菌试管收集流出的血液。用纱布压迫止血，并用酒精擦洗、再用冷水擦洗除去二甲苯。5～10min内可放血30～50ml。每3～4天可重新放血，在短期内至少可收集100ml血清。2．耳中央动脉采