一、培养基概述(Ɡàishù)（二）培养基准备(zhǔnbèi)及要求2.动物细胞培养基：①天然培养基：实验室②合成培养基：工业③无血清培养基：工业灭菌：微孔(wēikǒnɡ)滤膜过滤除菌3.植物细胞培养基：组分：无机盐类，碳源，维生素，植物生长激素，有机氮源，有机酸等灭菌：115-120℃，保持15~20min微孔(wēikǒnɡ)滤膜过滤除菌二、培养基灭菌(mièjūn)4、灭菌的方法①化学灭菌：②射线灭菌：③干热灭菌法：常用(chánɡyònɡ)于空玻璃器皿、金属器具的灭菌。④过滤灭菌：微孔滤膜过滤除菌；大多用于热敏性物料⑤湿热灭菌：121℃，保持20~30min5、湿热灭菌原理（1）原理：蒸汽在冷凝时释放出大量潜能，并且具有强大穿透力，在高温和水存在时，微生物细胞(xìbāo)中的蛋白质极易发生不可逆凝固性变性，致使微生物在短时间内死亡。湿热灭菌的效果，取决与致死温度和致死时间。（2）微生物热死规律----对数(duìshù)残留定律培养基中微生物受热死亡的速率与残留的微生物数量成正比。式中N：表示培养基残留的活菌数,个t：受热时间，minK：反应速度常数（比死亡速率），min-1K=f(灭菌温度、菌种、培养基等)将对数(duìshù)残留定律的积分形式变换为：式中N0：开始灭菌时原菌数，个；Nt：经时间t后残留菌数，个；k：意义同上t：表示理论灭菌时间(3)培养基灭菌温度的选择灭菌温度的选择应考虑的因素主要有：a.微生物的热致死温度：应高于该温度，通常以芽孢为准。b.营养成分的破坏(pòhuài)灭菌温度的选择，应是在保证灭菌效果的前提下，尽可能减少培养基中营养成分的破坏(pòhuài)。高温短时灭菌4、影响培养基灭菌的因素影响培养基灭菌的因素除了所污染杂菌的种类、数量(shùliàng)、灭菌温度和时间外，还有：1.培养基成分2.pH值3.培养基中颗粒4.泡沫三、培养基工业(gōngyè)灭菌及设备3、分批灭菌的操作过程(guòchéng)：（书P5）全过程(guòchéng)包括升温、保温、降温三个过程(guòchéng)。三路进汽：蒸汽从空气管道、取样管和出料管进入罐内直接加热，直到所规定的温度，并维持一定的时间。这就是所谓的“三路进汽”。注：凡是与培养基接触的管道都要进汽；凡是不与培养基接触的管道都要排汽操作要点：①加培养基，密封发酵罐，慢速搅拌；②夹套通蒸汽，培养基预热至75-90℃,停止搅拌；③进三路蒸汽，同时微开对应排气阀，排冷凝水；④调进汽阀，排汽阀保持罐压，在一定温度下（121℃），保温20-30min⑤灭菌完毕后，先关一路排汽阀，再关一路进汽阀，至三路排汽、进汽阀全关闭；⑥通无菌空气(kōngqì)；⑦夹套通冷凝水，冷却培养基（二）连续灭菌（连消）1、概念：培养基在发酵罐外经过一套灭菌设备(shèbèi)连续的加热灭菌，冷却后送入已灭菌的发酵罐内的工艺过程称为连续灭菌。空罐灭菌也称空消。无论是种子罐、发酵罐、还是尿素（或液氨）罐、消泡罐，当培养基（或物料）尚未进罐前对罐进行预先灭菌，称为空罐灭菌。2、优缺点：优点：可采用高温快速灭菌工艺；发酵罐非生产占用时间缩短，容积利用率提高；热能利用率合理，适于自动化控制缺点：不适合高粘度的培养基的灭菌；染菌可能性增高3、连续灭菌过程及设备设备流程图：配料罐→送料泵→预热(yùrè)罐→连消泵→加热器→维持罐→冷却器→发酵罐（1）加热器塔式加热器：书P11喷射加热器：书P12（2）维持罐：书P13灭菌系统中的维持设备，主要是使加热(jiārè)后的培养基在维持设备中保温一段时间，以达到灭菌的目的，也称保温设备。（3）冷却设备：书P17真空冷却器：当高温培养基进入真空冷却器后，在真空下，水分立即汽化，使培养基本身温度下降，达到冷却目的。喷淋冷却器：喷淋冷却器是将水通过喷淋装置均匀地淋在水平的排管上，以冷却管内的培养基。感谢您的观看(guānkàn)！内容(nèiróng)总结