生物大分子识别分离和检测学习PPT教案.pptx
上传人:王子****青蛙 上传时间:2024-09-12 格式:PPTX 页数:22 大小:484KB 金币:10 举报 版权申诉
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生物大分子生物大分子的识别质谱测定分析——一种识别生物大分子的方法芬恩的电喷雾质谱技术(ESI)原理图电喷雾质谱法electronspraymassspectrometryESMS样品的分子离子和裂片离子经一系列分离器和静电透镜进入质量分析器进行质谱分析。这种电喷雾质谱法具有很高灵敏度,且电离的分子可以带有多电荷,这种多电荷离子的产生大大扩展了普通质谱仪能分析的质量范围,使质谱仪可以分析分子量为几十万质量单位的蛋白质分子。精确度达到99.99%。激光解吸附电离飞行时间质谱MatrixAssistedLaserDesorptionIonizationTimeofFlightMassSpectrometry(MALDI-TOFMS)MALDI-TOFMS具有灵敏度高、准确度高、分辨率高、图谱简明、质量范围广及速度快等特点,在操作上制样简便、可微量化、大规模、并行化和高度自动化处理待检生物样品,而且在测定生物大分子和合成高聚物应用方面有特殊的优越性。近年来已成为检测和鉴定多肽、蛋白质、多糖、核苷酸、糖蛋白、高聚物以及多种合成聚合物的强有力工具。在核磁共振技术出现以前,X射线晶体分析技术是惟一可以研究蛋白质三维结构的方法。该法是根据蛋白质结晶对X射线的衍射作用实现的。但该法不能对溶液进行分析。核磁共振技术弥补了X射线晶体分析技术的不足,能够对溶液中的蛋白质进行分析,即在蛋白质最自然的生存环境下对它们进行研究,进而得到“活”蛋白质的结构。在结晶状态下蛋白质分子是紧紧地积压在一起的,而在溶液中它们则处在最自然的生理状态下。维特里希设计了一套将核磁共振信号与生物大分子中的质子相对应的系统分析方法。他进一步说明这些质子间的距离如何确定,再结合距离几何学的数学方法就可获得大分子清晰的三维结构图。如果确定了一座建筑物的所有工程数据,就可以快速而准确地绘出该建筑物的三维结构图。生物大分子的分离与检测色谱法膜色谱技术膜色谱特点为:优点:(1)生物大分子在膜介质中以对流传质为主,分离速度快,特别适用于生物大分子的快速分离(2)柱压低(3)易于放大,只要简单的增加柱长就可以达到目标(4)可直接处理复杂的生物样品,几乎不需要与处理(5)膜基质生物兼容性好缺点:(1)柱效低(2)耐压性差现代分离制备技术课程论文备选题MALDI-TOFMS具有灵敏度高、准确度高、分辨率高、图谱简明、质量范围广及速度快等特点,在操作上制样简便、可微量化、大规模、并行化和高度自动化处理待检生物样品,而且在测定生物大分子和合成高聚物应用方面有特殊的优越性。近年来已成为检测和鉴定多肽、蛋白质、多糖、核苷酸、糖蛋白、高聚物以及多种合成聚合物的强有力工具。膜色谱特点为:优点:(1)生物大分子在膜介质中以对流传质为主,分离速度快,特别适用于生物大分子的快速分离(2)柱压低(3)易于放大,只要简单的增加柱长就可以达到目标(4)可直接处理复杂的生物样品,几乎不需要与处理(5)膜基质生物兼容性好缺点:(1)柱效低(2)耐压性差