·94·中草药》Chinese Traditional and Herbal Drugs 2000年.doc
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资料汇编·94·《中草药》ChineseTraditionalandHerbalDrugs2000年第31卷增刊萌动激活赤灵芝孢子抑瘤作用的研究中山医科大学肿瘤防治中心(广州510060)陈小君*冯翠萍中山大学生命科学学院刘昕摘要通过对移植性动物瘤株的抑瘤试验来验证萌动激活的赤灵芝孢子对移植性动物肿瘤小鼠肝癌、小鼠肉瘤-180(S-180)及小鼠网细胞肉瘤(L-II)的抑瘤作用。无菌条件下将肿瘤细胞悬浮液接种于小鼠的右腋皮下,随机分成阴性对照组,阳性对照组,灵芝孢子粉实验组分为低、中、高剂量组。ig给药7d后处死小鼠,剥离肿瘤称瘤重,计算抑瘤率并作统计学处理。结果,在2~8g/(kg·d)剂量范围内对小鼠S-180的抑瘤率为42.3%~82.0%之间,P<0.001。对小鼠肝癌的抑瘤率为52.2%~86.1%,P值<0.01~0.001。对L-II的抑制率为54.0%~79.6%,此抑制作用有明显的量效关系。关键词萌动激活赤灵芝孢子抗肿瘤作用小鼠肝癌小鼠S-180小鼠网细胞肉瘤灵芝GanodermalucidumLeyssexFr.Karst为担子菌纲多孔菌科灵芝菌属真菌,自古以来被视为珍贵的延年益寿的药物。是我国传统的扶正固本,滋味强壮的珍贵药用真菌。近年来对灵芝的研究较为广泛[1~9]。但这些研究主要是对灵芝的子实体和丝菌体的研究,而对灵芝的另一种形态灵芝孢子的研究较少。灵芝孢子(ThesporesfromGanodermalucidumKarst)是灵芝发育周期中的另一形态即灵芝生长成熟期从菌盖弹射出来的象淡雾状的极其微小的孢子,具有灵芝的全部遗传活性物质。将休眠状态中的灵芝孢子萌动激活产生具有活性基团的生理活性物质(如灵芝多糖、灵芝孢子脂肪酸、灵芝孢子长链烷烃、灵芝三萜类化合物、超氧化物歧化酶、VitE、活性糖蛋白、多种生长因子等),其强烈的生理活性比通常的灵芝孢子高出数倍,最大限度地发挥了灵芝孢子粉的药效。本研究拟通过移植性动物肿瘤小鼠肝癌、小鼠肉瘤-180(S-180)及小鼠网细胞肉瘤(L-Ⅱ)的抑瘤试验,来证实赤灵芝孢子的抑瘤作用。1材料1.1动物:NIH小鼠,由广东省卫生厅实验动物中心提供,鼠重20~22g,雌雄各半。1.2瘤株:小鼠S-180、小鼠肝癌(Hepatoma)、小鼠网细胞肉瘤(Reticulosarcoma,L-Ⅱ)均由本所提供。1.3药品:萌动激活赤灵芝孢子口服液(0.2g/mL)由中山大学国家教育部食品工程研究中心及广州绿色盈康生物工程有限公司提供。环磷酰胺(CTX)为上海第十二制药厂的产品。阿霉素(ADM)由深圳万乐制药有限公司提供。2实验方法无菌条件下抽取腹腔保种7d生长良好的腹水型小鼠S-180、小鼠肝癌及小鼠网细胞肉瘤L-Ⅱ用注射用的生理盐水稀释后,将肿瘤细胞悬浮液接种于小鼠的右腋皮下,每只小鼠均接种0.2ml(1×107细胞)。接种后的小鼠均随机分成5组,每组10~12只。阴性对照组:注射用生理盐水20ml/(kg·d);阳性对照组:CTX20mg/(kg·d)或AND1mg/(kg·d),灵芝孢子低、中、高剂量组:2,4,8g/(kg·d)。各组小鼠均于接种瘤株后24h开始用灌胃器ig给药,低剂量组及中剂量组每天上午给药1次,高剂量组上午、下午各给药1次。连续用药7d。观察各组小鼠的活动状态、皮毛光泽度及粪便性状,于最后一次给药后次日用颈椎离断法处死小鼠,用天平称小鼠体重,用镊子捏住小鼠右腋肿瘤生长部位皮肤后,手术剪剪开皮肤暴露肿瘤,用手术剪钝性剥离肿瘤并用天平称瘤重。以抑瘤率(IR)来判断抑瘤作用。用t检验比较用药组与对照组的差异。给药组平均瘤重IR(%)=(1)×100%对照组平均瘤重3结果3.1灵芝孢子对小鼠S-180的抑瘤作用:见表1。其抑瘤率:低剂量组3次实验分别为42.3%、44.9%及45.2%;中剂量组分别为56.2%、56.9%及57.3%;高剂量组分别为:79.3%、81.9%及82.0%。各用药组平均瘤重与阴性对照组平均瘤重比P<0.001。*陈小君,女,中山医科大学肿瘤研究所教授,研究生导师。1960年毕业于中山医学院,继续攻读生物化学研究生,留校后从事抗癌药物的药理、肿瘤化疗及肿瘤分子生物学的研究,发表论文多篇,曾获国家教季,广东省卫生厅,高教厅科技进步奖,并参加《现代医学进展》的编写及《维生素、营养与癌》的主译者之一。《中草药》ChineseTraditionalandHerbalDrugs2000年第31卷增刊·95·表1灵芝孢子粉对小鼠移植性肿瘤S-180的作用组别剂量(g/kg·d)动物数始/末体重(g)瘤重(g)(x±s)抑瘤率(%)P值(与对照组比)始末变